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小鼠杂交瘤细胞(抗CEA);1116NS-3d使用说明书

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更新时间:2017-01-24 14:56:25浏览次数:299次

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产品简介

小鼠杂交瘤细胞(抗CEA);1116NS-3d使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

产品名称小鼠杂交瘤细胞(抗CEA);1116NS-3d使用说明书
货期3-5天
发货地上海

细胞名称  小鼠杂交瘤细胞(抗CEA);1116NS-3d使用说明书
形态特性   淋巴母细胞样
生长特性  悬浮生长
特征特性   可产生单克隆抗体,抗原为癌胚抗原CEA。 
培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10% FBS
传代方法   1:2。3天内可长满。
传代情况  PN
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  阴性
STR  
同工酶  
染色体  
使用权限  B类

小鼠杂交瘤细胞(抗CEA);1116NS-3d使用说明书复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
小鼠杂交瘤细胞(抗CEA);1116NS-3d使用说明书操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
产品名称    规格    产品说明
双料乳糖蛋白胨培养液    10ml×20支/箱    用于大肠菌群发酵测定
单料乳糖蛋白胨培养液    10ml×20支/箱    用于大肠菌群发酵测定
克氏双糖铁琼脂(KI)斜面(限供汽运)    10ml×20支/箱    用于肠道菌的复合生化试验
双料乳糖胆盐发酵管    10ml×20支/箱    含倒管,用于大肠菌群测定
缓冲蛋白胨水(BPW)    10ml×20支/箱    用于克雷伯氏菌MPN检测
EC肉汤    8ml×20支/箱    含倒管,用于大肠菌群测定
4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)    5ml×10支/盒    用于大肠埃希氏菌检验
Korser氏柠檬酸盐肉汤    10ml×20支/箱    用于柠檬酸盐利用实验
MUGal肉汤(含头孢磺啶)    10ml×20支/箱    用于大肠菌群快速检测
肠道菌增菌肉汤    10ml×20支/箱    用于肠道菌增菌
单料乳糖胆盐发酵管    10ml×20支/箱    含倒管,大肠菌群测定
煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤    9ml×20支/箱    含倒管,大肠菌群测定
月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤    10ml×20支/箱    含倒管,用于大肠菌群测定HES4    转录因子HES4抗体
HS1BP3    造血干细胞特异相关结合蛋白3抗体
HDHD1    HDHD1蛋白抗体
HDHD2    HDHD2蛋白抗体
HCF-1    宿主细胞因子1抗体
HIST1H2AH    组蛋白H2A/S抗体
小鼠杂交瘤细胞(抗CEA);1116NS-3d使用说明书HRH2    组胺受体H2抗体
phospho-HRH1(Ser398)    磷酸化组胺受体H1抗体
HOXA11    同源盒蛋白HOXA11抗体
HRH1    组胺受体H1抗体
HOXA9    同源盒蛋白HOXA9抗体

 

 

 


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