细胞名称 人肺巨细胞癌细胞；PLA-801D使用说明书
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系为人肺巨细胞癌高转移株,据报道，该细胞具有高表达的端粒酶活性。可用于肺癌的基础和临床研究。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
XCR7 细胞表面趋化因子受体7抗体
C1orf76 神经母细胞瘤源分泌蛋白抗体
CHMP2B 染色质修饰蛋白2B抗体
CKAP1 细胞骨架相关蛋白1/微管蛋白折叠辅助因子B抗体
CLN5 神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN5抗体
CLN8 神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN8抗体
CRBN cereblon蛋白抗体
CTRP5 补体C1q和肿瘤坏死因子相关蛋白5抗体
CUG-BP1 胞苷尿苷鸟苷结合蛋白1抗体
Chordin 原肠胚双向形成相关蛋白抗体
CDC123 细胞分裂周期蛋白CDC123抗体
CLN3 神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN3抗体
CKLFH3 趋化素样因子超家族成员3抗体
CHMP1B 染色质修饰蛋白1B抗体 10522 BTB 培养基 250g/瓶 用于弧菌的选择性增菌
10523 氯化钠结晶紫增菌液 250g/瓶 用于副溶血性弧菌的选择性增菌
10601 改良磷酸盐缓冲液 250g/瓶 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌
10602 CIN-1 培养基 250g/瓶 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌分离， 每 100ml 培养基中添加 1 支 20601
10603 改良 Y 培养基 250g/瓶 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌分离
10604 改良克氏双糖铁培养基 250g/瓶 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的初 步鉴定
10605 改良的酵母浸汁-孟加拉红肉汤 250g/瓶 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌
10606 ITC 肉汤基础 250g/瓶 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的选 择性增菌，每 100ml 培养基中添加1 支 20610
10607 SSDC 培养基 250g/瓶 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的选 择性分离（ISO）
10608 DYS 耶尔森菌琼脂 250g/瓶 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的分 离培养
10901 葡萄糖肉浸液肉汤 250g/瓶 用于溶血性链球菌增菌
10902 匹克氏肉汤基础 100g/瓶 用于溶血性链球菌增菌，每 50ml 培养基中添加 1 支 20902 和脱纤维 兔血（或羊血）2.5ml
