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人前列腺癌细胞;2B4复苏

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所  在  地上海市

更新时间:2017-01-23 11:02:42浏览次数:156次

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产品简介

人前列腺癌细胞;2B4复苏现货供应,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!

详细介绍

人前列腺癌细胞;2B4复苏来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

细胞名称  人前列腺癌细胞;2B4复苏
形态特性   上皮细胞样
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞是一株人前列腺癌细胞系,可用于人前列腺癌细的基础和临床研究。 
培养条件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
传代方法   1:3传代,2-3天传一代
传代情况  C6
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  阴性
STR  
同工酶  同工酶鉴定
染色体  
使用权限  A类

产品名称生长特性发货地货期
贴壁生长上海3-5天

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
    10504    3%氯化钠三糖铁琼脂    250g/瓶    副溶血性弧菌生化试验    
    10505    我妻氏血琼脂基础    250g/瓶    用于副溶血性弧菌神奈川试验,每100ml 培养基中需添加 5ml50701    
    10506    四号琼脂基础    250g/瓶    用 于 霍 乱 弧 菌 选 择 性 分 离 , 每100ml 培养基中添加 2 支 20518    
    10507    *琼脂基础    250g/瓶    用 于 霍 乱 弧 菌 选 择 性 分 离 , 每100ml 培养基中添加 1 支 20543    
    10508    嗜盐菌选择性琼脂    250g/瓶    含 4%NaCl,用于副溶血性弧菌的纯 化    
    10509    氯化钠多粘菌素 B 肉汤(SPB)基础    250g/瓶    用于副溶血性弧菌选择性增菌,每100ml 培养基中添加 1 支 20519    
    10510    O/F 试验用培养基    250g/瓶    用于弧菌葡萄糖利用试验(O/F 试 验)    
    10511    碱性蛋白胨水(APW)    250g/瓶    用于弧菌选择性增菌    
    10512    氯化钠营养琼脂    250g/瓶    用于副溶血性弧菌的纯化    
    10513    氯化钠三糖铁琼脂    250g/瓶    含 1.5%NaCl,用于弧菌生化试验    
    10514    42℃生长试验用培养基    250g/瓶    用于副溶血性弧菌 42℃生长试验    
    10517    mCPC 琼脂基础(CC 琼脂基础)    250g/瓶    用于创伤弧菌的选择性分离 。每 90ml 培养基中添加 2 支 20541、1支 20542 和 1 支 21201    
    10518    碱性琼脂    250g/瓶    用于霍乱弧菌的选择性分离    
    10519    碱性胆盐琼脂    250g/瓶    用于霍乱弧菌的选择性分离    
    10520    氯化钠蔗糖琼脂培养基    250g/瓶    用于副溶血性弧菌的分离培养  CAPON    神经型一氧化氮合成酶结合蛋白抗体
CHRM4    毒蕈碱型乙酰*受体M4抗体
CaMK2 alpha    钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体
CACYBP    周期蛋白结合蛋白抗体
CDCA2    细胞分裂周期蛋白2抗体
CDC45L    细胞分裂周期调控蛋白45抗体
CAPH    染色体相关蛋白H抗体
CEP76    中心体蛋白质76抗体
CEP152    中心体蛋白152抗体
Casein kinase 1 gamma 2    酪蛋白激酶1γ2/casein kinase Iγ1抗体
CLPTM1    唇裂和腭裂相关跨膜蛋白1抗体
CKLFH8    趋化素样因子超家族成员8抗体
CKLFH1    趋化素样因子超家族成员1抗体

 

 


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