【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人肺腺癌细胞；NCI-H441使用说明书
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 NCI-H441建系于1982年（A.F. Gazdar，et al.)。该细胞分离自一名肺腺癌患者的心包液。该细胞能在半固体琼脂糖中形成克隆，并能表达肺泡表面活性蛋白A。该细胞在有血清培养基中倍增时间为58小时，在无血清培养基中倍增时间为99-138小时。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C10
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
C1orf25 1号染色体开放阅读框25抗体
C1orf31 1号染色体开放阅读框31抗体
C1orf51 1号染色体开放阅读框51抗体
C1orf52 1号染色体开放阅读框52抗体
C1orf67 1号染色体开放阅读框67抗体
C1orf83 1号染色体开放阅读框83抗体
CRISP3 富含半*分泌蛋白3抗体
CT26 肿瘤/抗原26抗体
CDKN2C 细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂2C抗体
Cullin 2 Cullin2抗体
CAMK1D 钙调蛋白激酶CaMK1D抗体
CHX10 CHX10蛋白抗体
CRIPTO 畸胎瘤衍化生长因子单克隆抗体(C端)
CDKN2B 细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂2B抗体 11705 十六烷基*基*培养基 250g/瓶 用于绿脓杆菌分离培养
11706 乙酰胺培养基 250g/瓶 用于绿脓杆菌分离培养
11707 绿脓菌素测定培养基 250g/瓶 用于绿脓菌素测定，每 100ml 培养 基中添加 1 支 21702
11710 溴化十六烷基*铵琼脂培养基 250g/瓶 用于铜绿假单胞菌的选择性分离
11713 假单胞菌 CFC 选择性培养基 250g/瓶 用 于 假 单 胞 菌 选 择 性 分 离 ， 每100ml 培养基中添加 1 支 21702 和21704
11717 假单胞菌琼脂培养基 250g/瓶 用于铜绿假单胞菌绿脓菌素测定， 每 100ml 培养基中添加 1 支 21702
11726 假单胞菌分离琼脂 250g/瓶 用于假单胞菌的检验
11728 NAC 琼脂培养基 250g/瓶 用于铜绿假单胞菌的分离培养
11730 洋葱假单胞菌琼脂基础（PC） 250g/瓶 用于洋葱假单胞菌的分离，每升培 养基中添加过滤除菌的 羟基噻吩 青霉溶液素（100mg）和多粘菌素 B 溶液（300,000units）
11401 含 0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤（TSB-YE） 250g/瓶 用于李斯特氏菌的培养
11402 含 0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂（TSA-YE） 250g/瓶 用于李斯特氏菌纯化
11403 李氏增菌肉汤（LB1，LB2）基础 250g/瓶 用于李斯特氏菌增菌，每 225ml 培养 基中添加 1 支 21401 和 1 支 21402 组成 LB1，每 200ml 培养基中添加 1 支 21416 和 1 支 21417 组成 LB2
11404 PALCAM 琼脂基础 250g/瓶 用 于 李 斯 特 氏 菌 选 择 性 分 离 ， 每100ml 培养基中添加 1 支 21403
11407 Fraser 肉汤增菌液基础 250g/瓶 用于李斯特氏菌增菌，每 225ml 培养基中添加 21407、21408、21418 各 1 支组成 Half-Fraser，每 100ml 添加 1 套支 21419、21420 组成 Fraser
11408 牛津琼脂（OXA）基础 250g/瓶 用 于 李 斯 特 氏 菌 选 择 性 分 离 ， 每100ml 培养基中添加 1 支 21409
11411 EB 肉汤增菌液基础 250g/瓶 用于李斯特氏菌的选择性增菌，每225ml 培养基中添加 1 支 21410
