【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人肝癌细胞；SMMC-7721使用说明书
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 用Northern blot方法，未能检测到细胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表达。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:13.3；D16S539:9,10；D18S51:16；D19S433:13；D21S11:27,28；D2S1338:17；D3S1358:15,18；D5S818:12；D7S820:12；D8S1179:12；FGA:18,21；TH01:7；TPOX:12；vWA:16,18
同工酶
染色体
使用权限 A类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
NZCYM琼脂 NZCYM Agar 100克 BR
NZCYM肉汤 NZCYM Broth 100克 BR
疱肉牛肉粒 Dried Meat Particle 100克 加入苞肉基础中配成苞肉培养基
SOB肉汤 SOB Broth 250克 BR
SOB琼脂 SOB Agar 250克 BR
SOC肉汤 SOC Broth 250克 用于基因工程菌大肠杆菌培养
超级肉汤 Super Broth 250克 BR
超级琼脂 Super Agar 250克 BR
TYGPN培养基 TYGPN Medium 250克 BR
印度墨水 Indian ink 100毫升 炭疽杆菌检测用配套试剂
碘附 Iodophor 500克 炭疽杆菌检测用配套试剂
Campy-Cefex添加剂 Campy-Cefex Supplement 2毫升×10支 添加于200ml CAMPY-CEFEX琼脂基础中
CLED培养基添加剂 CLED Medium Supplement 1毫升×5支 加入100mlC.L.E.D培养基中
7% NaC1胰胨水发酵管 7% NaC1胰胨水发酵管 20支 BRTetanus toxin light chain 英文名称： 破伤风毒素轻链抗体 ?0.1ml
Tubb3/Tubulin beta 3 英文名称： 微管蛋白β3抗体 ?0.1ml
TNFRSF13B 英文名称： 肿瘤坏死因子受体超家族成员13B抗体 ?0.2ml
TXNDC4 英文名称： 内质网蛋白44抗体 ?0.1ml
URG4 (C terminal) 英文名称： 上调基因4抗体（C端） ?0.2ml
Urocortin 3 英文名称： 尿皮质素UCN3抗体 ?0.1ml
Uromucoid 英文名称： 尿调节蛋白抗体 ?0.1ml
UFD1L 英文名称： 泛素融合降解样蛋白1抗体 ?0.2ml
USP9X 英文名称： 泛素特异蛋白酶9X抗体 ?0.2ml
USP10 英文名称： 去泛素酶10抗体 ?0.2ml
GPR14 英文名称： G蛋白偶联受体14抗体 ?0.1ml
