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人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH培养

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所  在  地上海市

更新时间:2017-01-21 12:18:30浏览次数:217次

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产品简介

人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH培养细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

产品名称人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH培养
货期3-5天
发货地上海

细胞名称  人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH培养
形态特性   上皮细胞
生长特性  贴壁生长
特征特性   SK-N-SH细胞系由J.L.Bieder建系,它与SK-N-MC所不同的是倍增时间较长且多巴胺-β-羟基酶水平较高。 SK-N-SH在细胞介导的细胞毒性试验中用作靶细胞系。 
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  优质胎牛血清,10%
传代方法   消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况  P(34+5)
冻存条件   *培养基+8%DMSO
支原体检测  阴性
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:11;D16S539:8,13;D18S51:13,16;D19S433:13,14;D21S11:31,31.2;D2S1338:17,19;D3S1358:15,16;D5S818:12;D7S820:7,10;D8S1179:15;FGA:23.2,24;TH01:7,10;TPOX:8,11;vWA:14,18
同工酶  
染色体  
使用权限  A类
参考文献  

复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
大肠杆菌O157显色培养基配套平皿    O157 Chromogenic Medium Dish    9㎝/块    
沙门氏菌显色培养基配套平皿    Salmonella Chromogenic Medium Dish    9㎝/块    
李斯特氏菌显色培养基配套平皿    Listera Chromogenic Medium Dish    9㎝/块    
*显色培养基    Staphylococcus Chromogenic Medium    1升    用于*的显色培养
*显色培养基配套平皿    Staphylococcus Chromogenic Medium Dish    9㎝/块    
霉菌和酵母菌显色培养基配套平皿    Mould And Yeast Chromogenic Medium Dish    9㎝/块    
阪崎肠杆菌显色培养基    Enterobacter Sakazakii Chromogenic Medium    1升    用于坂崎杆菌的显色培养,坂崎杆菌显蓝色,其他肠杆菌显无色
*12测定用培养基    Vitamin B12 Assay Broth    250克    婴儿食品和乳粉中*12测定
支原体琼脂基础培养基    Mycoplasma Agar Base    250克    用于支原体的分离培养
支原体肉汤培养基    Mycoplasma Broth    250克    用于培养支原体的基础培养基
BBE琼脂    BBE Agar    250克    脆弱拟杆菌群的分离培养
溴百里酚蓝乳糖*琼脂    Cystine-Lactose-Electrolyte Deficient Agar    250克    尿液中微生物的选择性分离培养Phospho-Tuberin (Thr927)    英文名称:    磷酸化马铃薯球蛋白(结节硬化)抗体    ?0.1ml
phospho-Tau protein(Ser396)    英文名称:    磷酸化微管相关蛋白抗体    ?0.1ml
TNK1    英文名称:    非受体型*蛋白激酶Tnk1抗体    ?0.1ml
Phospho-TNK1 (Tyr277)    英文名称:    磷酸化非受体型*蛋白激酶Tnk1抗体    ?0.1ml
phospho-TOPO II Alpha (Ser1106)    英文名称:    磷酸化DNA拓普西异构酶Ⅱ抗体    ?0.1ml
TORC1    英文名称:    环腺苷酸应答元件结合蛋白转录共激活因子TORC1抗体    ?0.2ml
Phospho-Torc1 (Ser151)    英文名称:    磷酸化CREB转录共激活因子TORC1抗体    ?0.1ml
TORC2    英文名称:    CREB转录共激活因子TORC2抗体    ?0.1ml
TNF beta    英文名称:    肿瘤坏死因子β抗体(TNFβ)    ?0.1ml
TCF7L2    英文名称:    转录因子7类似物2抗体    ?0.1ml
TBX2    英文名称:    血栓素B2(一种新发现的抑癌基因)抗体    ?0.2ml
TSSK6    英文名称:    特异*/*激酶6抗体    ?0.2ml

 

 


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