【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0923使用说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:2传代；5-6天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
Kv4.3 英文名称： 离子通道蛋白Kv4.3抗体 ?0.1ml
KLLN 英文名称： Killin-p53调节复制抑制蛋白抗体 ?0.2ml
Lysyl tRNA synthetase 英文名称： 赖氨酸tRNA的连接酶抗体 ?0.2ml
Kidins220 英文名称： 220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗体 ?0.2ml
phospho-Kidins220 (Ser918) 英文名称： 磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗体 ?0.1ml
KRV-VP1 + KRV-VP2 (C-terminus) 英文名称： 基尔曼氏细小病毒VP1/VP2抗体(大鼠潜在病毒KRV)C端 ?1ml
KCNQ1 英文名称： 钾离子通道蛋白家族KCNQ1抗体 ?0.1ml
KMT1A 英文名称： 组蛋白H3 K9甲基转移酶抗体 ?0.1ml
KAT13D 英文名称： 生物钟KAT13D蛋白抗体 ?0.2mlPABA(Mouse para-aminobenzoic acid) ELISA Kit 小鼠对氨基苯甲酸 Multi-class antibodies 规格： 48T
hs-CRP(Mouse high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit 小鼠超敏C反应蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
Beta2-GP1 IgA/G/M(Mouse Beta2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M) ELISA Kit 小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M Multi-class antibodies 规格： 48T
LAT(Mouse Linker for activation of T cell) ELISA Kit 小鼠T细胞活化连接蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
EMAb(Mouse Endometrium Antibody) ELISA Kit 小鼠抗子宫内膜抗体 Multi-class antibodies 规格： 48T
LDL-IC(Mouse LDL-IC) ELISA Kit 小鼠低密度脂蛋白免疫复合物 Multi-class antibodies 规格： 48T
UU-Ab(Mouse Ureaplasma urealyticum antibody) ELISA Kit 小鼠解脲脲原体抗体 Multi-class antibodies 规格： 48T
GFAP(Mouse glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit 小鼠神经胶质纤维酸蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
pANCA(Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 小鼠抗中粒细胞核周抗体 Multi-class antibodies 规格： 48T
PI Ab-IgG/IgM(Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 小鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM Multi-class antibodies 规格： 48T
15-LO/LOX(Mouse 15-lipoxygenase) ELISA Kit 小鼠15脂加氧酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
IFN- Beta/IFNB(Mouse Interferon Beta) ELISA Kit 小鼠β干扰素 Multi-class antibodies 规格： 48T
