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elisa酶联免疫试剂盒说明书实验原理

阅读:86发布时间:2017-09-29

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elisa酶联免疫试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猪免疫球蛋白A(IgA)水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入免疫球蛋白A(IgA),再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白A(IgA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪免疫球蛋白A(IgA)浓度。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
120µg/ml5号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液
60µg/ml4号标准品150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液
30µg/ml3号标准品150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液
15µg/ml2号标准品150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液
7.5µg/ml1号标准品150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl,待测样品孔中先加样品稀释液40µl,然后再加待测样品10µl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
elisa酶联免疫试剂盒Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒    ,英文名:    PⅢCP ELISA Kit
Ⅲ型前胶原(HPCⅢ)ELISA试剂盒    ,英文名:    HPCⅢ ELISA Kit
Ⅲ型胶原蛋白(COL Ⅲ)ELISA试剂盒    ,英文名:    COL Ⅲ ELISA Kit
Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA试剂盒    ,英文名:    Col Ⅲ ELISA Kit
Ⅱ型前胶原羧基端肽(PⅡCP)ELISA试剂盒    ,英文名:    PⅡCP ELISA Kit
Ⅱ型前胶原N端前肽(PⅡNP)ELISA试剂盒    ,英文名:    PⅡNP ELISA Kit
Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA试剂盒    ,英文名:    HELIX-Ⅱ ELISA Kit
Ⅱ型胶原交联C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA试剂盒    ,英文名:    CTX-Ⅱ ELISA Kit
Ⅱ型胶原代谢产物C2C(C2C)ELISA试剂盒    ,英文名:    C2C ELISA Kit
Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA试剂盒    ,英文名:    CTX-Ⅱ ELISA Kit
Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒    ,英文名:    Col Ⅱ ELISA Kit
Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6/MUC1)ELISA试剂盒    ,英文名:    KL-6/MUC1 ELISA Kit
Ⅰ型前胶原羧基末端前肽(PⅠCP)ELISA试剂盒    ,英文名:    PⅠCP ELISA Kit
Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒    ,英文名:    PⅠCP ELISA Kit
Ⅰ型前胶原氨基端肽(PⅠNP)ELISA试剂盒    ,英文名:    PⅠNP ELISA Kit
Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA试剂盒    ,英文名:    PⅠNP ELISA Kit
Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA试剂盒    ,英文名:    CⅠCP ELISA Kit
Ⅰ型胶原羧基端肽(ⅠCTP)ELISA试剂盒    ,英文名:    ⅠCTP ELISA Kit
Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(CTX-I)ELISA试剂盒    ,英文名:    CTX-I ELISA Kit
Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA试剂盒    ,英文名:    ⅠCTP ELISA Kit
Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA试剂盒    ,英文名:    NTX ELISA Kit
Ⅰ型胶原C端肽(ICTP)ELISA试剂盒    ,英文名:    ICTP ELISA Kit
Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒    ,英文名:    CTX-Ⅰ ELISA Kit
Ⅰ型胶原C 端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒    ,英文名:    CTX-Ⅰ ELISA Kit
Ⅰ型胶原(ColⅠ)ELISA试剂盒    ,英文名:    ColⅠ ELISA Kit
Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒    ,英文名:    Col Ⅰ ELISA Kit
8异前列腺素F2α(8-isoPGF2α)ELISA试剂盒    ,英文名:    8-isoPGF2α ELISA Kit
8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)ELISA试剂盒    ,英文名:    8-iso-PGF2a ELISA Kit
8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒    ,英文名:    8-iso-PG ELISA Kit
8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA试剂盒    ,英文名:    8-epi-PGF2α ELISA Kit
elisa酶联免疫试剂盒

 


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