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小鼠脂质运载蛋白2(LCN2)ELISA检测试剂盒使用说明书

阅读:152发布时间:2017-01-11

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小鼠脂质运载蛋白2(LCN2)ELISA检测试剂盒操作步骤
标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为240 pg/ml,160 pg/ml,80 pg/ml,40 pg/ml,20 pg/ml)。
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
温育:操作同3。
洗涤:操作同5。
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
小鼠脂质运载蛋白2(LCN2)ELISA检测试剂盒测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
动物种属鉴定 PCR Mix 2    100 次    *
动物种属鉴定 PCR Mix 3    100 次    5,5- 二硫代双 (2- 硝基苯甲酸 )
动物种属鉴定 PCR Mix 4    100 次    二硫苏糖醇 (DTT)
动物种属鉴定 PCR Mix 5    100 次    DL- 苹果酸
动物种属鉴定 PCR Mix 6    100 次    DMEM( 高糖 )
动植物膜蛋白微量制备试剂盒    50 次    DMEM( 低糖 )
动植物总蛋白微量提取试剂盒    50 次    崩溃酶
杜氏 PBS 缓冲液 ,10×    100mL    供体马血清
端粒酶重复片段扩增试剂盒 (TRAP)    50 次    二硫赤藓醇
对氨基苯磺酸    25g    溴化乙锭 (EB)
对苯醌固定液    250 mL    乙基二甲基胺丙基碳化二亚胺
对硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷    1g    乙二胺四乙酸 (EDTA)
对硝基苯磷酸二钠盐    1g    乙二醇双 (2- 氨基乙基 ) 四乙酸 (EGTA)
多点突变试剂盒    20 次    伊红 Y 二钠盐,水溶性
多酚氧化酶 ( 菌菇 )    25KU    伊红 Y, 醇溶性
多核苷酸磷酸化酶    100mg    *
多聚 -L- 赖氨酸 (15-30 万 )    25mg    赤藓红 B 二钠盐
小鼠脂质运载蛋白2(LCN2)ELISA检测试剂盒

 


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