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elisa检测试剂盒操作步骤

阅读:185发布时间:2017-5-19

elisa检测试剂盒原理
利用双抗体夹心技术,将抗CEA的单克隆抗体包被于聚苯乙烯塑料珠上,制成固相抗体珠,用此珠去吸附样品中的CEA,充分洗涤后再依次与酶标记CEA抗体与底物反应,以成色后的吸光度值从剂量反应曲线查得样品中的cEA含量。
试剂
    1.CEA标准液 用纯化CEA配制为浓度分别为0、1.5、3.0、10.0、20.ong/ml系列标准液。
    2.CEA抽提液0.Zmol/L醋酸钠缓冲液(pHS.0)。
    3.基质应用液取邻苯二胺80mg溶于pHS.O磷酸一拘摊酸缓冲液50ml中,56℃水浴中助溶。*溶后加人新鲜的30%HZ认20川,混匀。此基质液呈无色透明液体,若显黄色不能使用。将此底物液贮于棕色瓶中,30而n内用完。
    4.辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗CEA抗体。
    5.洗涤液0.osmol/LP赘(pH7.40)一0.1%Tween一20.
    6.抗CEA单克隆抗体包被的圆珠.
    7.待检血样血清(浆)。
操作步骤
    1.待检抗原的制备取待检血清或血浆0.sml,加0.Zmol/L醋酸钠缓冲液
(pHS.o)1.oml,混匀后于70℃水浴内15min。以3 000r/而n离心10而n。取上清液作
为3倍稀释的待检抗原。阳性对照品必须同步处理。
    2.在20孔反应板上每孔中加人上述(*步操作)待检抗原0.Zml。同时加人
CEA标准抗原及阳性对照抗原。每份样品均作平行两孔。
    3.用镊子夹起CEA固相抗体珠,甩掉附着的液体后投人孔内。反应板上班盖一张
干净纸,将板漂浮于37℃水浴中反应Zh。注意勿盖水箱盖,反应完成后可连续操作或
置4℃过夜。
    4.用PBS一Tween一20洗涤液洗涤3次。每次加入洗涤液后放置3而n再抽净(负压抽吸)洗液。zui后一次洗液放人后静置至准备加酶标记抗CEA之前时再抽净。
    5.二抗液制备 取每支冻干的酶标记抗CEA抗体用蒸馏水1.Oml溶解,因冻干时加有明胶保护剂,溶解时须放置37℃水浴中lmin。待充分溶解后再按要求稀释至zui适工作浓度。
    6.将孔中洗涤液抽净,每孔加人酶标记抗CEA工作液0.Zml,将反应板用干净纸覆盖后再漂浮于37℃水浴中反应2h,勿盖水箱盖。
 elisa检测试剂盒1,3-βD glu     小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶     规格:    48T/96T
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 HIS     豚鼠组胺     规格:    48T/96T
 TGF-β1     豚鼠转化生长因子β1     规格:    48T/96T
 MHC/GPLA     豚鼠主要组织相容性复合体     规格:    48T/96T
 TNF-α     豚鼠肿瘤坏死因子α     规格:    48T/96T
 CH50     豚鼠血清总补体     规格:    48T/96T
 NO     豚鼠血清一氧化氮     规格:    48T/96T
 PAP     豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物     规格:    48T/96T
 AGEs     豚鼠晚期糖基化终末产物     规格:    48T/96T
 GH     豚鼠生长激素     规格:    48T/96T
 eNOS     豚鼠内皮型一氧化氮合成酶     规格:    48T/96T
 ET-1     豚鼠内皮素1     规格:    48T/96T
 ET-1     豚鼠内皮素1     规格:    48T/96T
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 IgE     豚鼠免疫球蛋白E     规格:    48T/96T
 IgA     豚鼠免疫球蛋白A     规格:    48T/96T
 OVA sIgG     豚鼠卵清蛋白特异性IgG     规格:    48T/96T
 OVA sIgE     豚鼠卵清蛋白特异性IgE     规格:    48T/96T
 CGRP     豚鼠降钙素基因相关肽     规格:    48T/96T
 TIMP-1     豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1     规格:    48T/96T
 MMP-9     豚鼠基质金属蛋白酶9     规格:    48T/96T
 LPO     豚鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶     规格:    48T/96T
 Lebtospira     豚鼠钩端螺旋体IgG     规格:    48T/96T
 HGF     豚鼠肝细胞生长因子     规格:    48T/96T
 TE     豚鼠端粒酶     规格:    48T/96T
 MCP-4/CCL13     豚鼠单核细胞趋化蛋白4     规格:    48T/96T
 FSH     豚鼠促卵泡素     规格:    48T/96T
 SOD     豚鼠超氧化物歧化酶     规格:    48T/96T
 iFABP     豚鼠肠脂肪酸结合蛋白     规格:    48T/96T
 EGF     豚鼠表皮生长因子     规格:    48T/96T
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 LTB4     豚鼠白三烯B4     规格:    48T/96T
 IL-4     豚鼠白介素4     规格:    48T/96T
 IL1Ra     豚鼠白介素1受体拮抗剂     规格:    48T/96T
 IL-12/P70     豚鼠白介素12     规格:    48T/96T
 IFN-γ     豚鼠γ干扰素     规格:    48T/96T
 TF     兔子组织因子     规格:    48T/96T
 t-PA     兔子组织型纤溶酶原激活剂     规格:    48T/96T
 TPA     兔子组织多肽抗原     规格:    48T/96T
 HIS     兔子组胺     规格:    48T/96T
 TGF-β1     兔子转化生长因子β1     规格:    48T/96T
 MHCⅢ/RLAⅢ     兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类     规格:    48T/96T
 TRAIL-R3     兔子肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3     规格:    48T/96T
 TNF-α     兔子肿瘤坏死因子α     规格:    48T/96T
 NE     兔子中性粒细胞弹性蛋白酶     规格:    48T/96T
 ADP     兔子脂联素     规格:    48T/96T
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 PROG     兔子孕激素/孕酮     规格:    48T/96T
 IGF-2     兔子胰岛素样生长因子2     规格:    48T/96T
 IGF-1     兔子胰岛素样生长因子1     规格:    48T/96T
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 PF-4/CXCL4     兔子血小板因子4     规格:    48T/96T
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