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进口elisa试剂盒讲述sAc/Ds双系统法的应用原理

阅读:150发布时间:2016-12-5

进口elisa试剂盒sAc/Ds双系统法克隆基因的原因及步骤 
1)将sAc和Ds分别与T-DNA连接,在农杆菌的帮助下分别转入植物中,获得sAc的转化植株和Ds的转化植株。 2)将sAc转化株与Ds转化株杂交,挑选同时含有sAc和Ds的子一代植株。 
3)杂合植株中,Ds在sAc产生的转位酶帮助下转座,引起某个基因突变,从而产生表型突变株。 
4)通过突变植株的自交和回交,选择仅含有Ds而无sAc的植株,从而使变异得到稳定。建立对应于变异株的基因文库或cDNA文库。 
5)用IPCR的方法扩增与Ds相邻的DNA片段,利用此片段作探针直接从基因文库或cDNA文库中筛选对应的基因克隆,通过DNA测序和比较了解该基因的特征。 
6)稳定的变异株再与sAc转化株杂交,使得Ds再次转位,使突变的基因得到恢复,从而得到回复突变株,用于检验所得到的基因是否对应于变异的基因。 
进口elisa试剂盒sAc/Ds双系统法的应用 
用sAc/Ds双系统法克隆基因,容易得到回复突变株和容易产生再次突变克隆其它基因,与T-DNA做基因标签相比省去了再次转化的繁琐程序,为克隆基因的工作带来了极大方便。 
理论上用sAc/Ds双系统法克隆基因如果有足够的转化株,能克隆到任何一个基因,另外这种方法还可用于定点突变。如果对某一基因我们不知道它的表达产物,也不知道它何时在何部位表达,sAc/Ds双系统法是一种较好的克隆基因的方法,该方法以其*的优点在克隆基因工作中将得到更广泛的应用。
H6878-25G    8-Hydroxyquinoline 8-羟基喹啉    148-24-3
T5500-50G    2-Thiobarbituric acid  2-硫代巴比妥酸    504-17-6
T5500-10G    2-Thiobarbituric acid  2-硫代巴比妥酸    504-17-6
G8772-10G    Glass beads,acid-washed 玻璃珠    /
SL9010-250ml    Folin-Ciocalteu''''s Phenol Reagent 福林酚    /
D7299-10G    2`4-D 2,4-二氯苯氧乙酸    94-75-7
X0819-5G    Xylene Cyanol FF 二甲苯青FF    2650-17-1
X0819-1G    Xylene Cyanol FF 二甲苯青FF    2650-17-1
T0765-1G    TTC  2,3,5-氯化三苯基四氮唑    298-96-4
T0765-5G    TTC  2,3,5-氯化三苯基四氮唑    298-96-4
ER0201    Cfr42 I    
ER1881    HpyF3I    
ER1791    SsiI    
ER1661    FspAI    
ER1551    Psu I    
ER1501    Bfu I    
ER1452    BseX I    
ER1371    Sch I    
SM1293    MassRuler Express Reverse DNA Ladder Mix, ready-to-use    

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