ROSGreen^TM H₂O₂ Probe 过氧化.*氢荧光探针

搜索关键词：

Hydrogen Peroxide 过氧化氢；H₂DCFDA (DCFH-DA, DCFH)；BES-H2O2-Ac；APF 氨基苯基荧光素; Mitosox Red;

同义名：

ROSGreen^TM Hydrogen peroxide Probe；ROSGreen^TM Hydrogen peroxide sensor；ROSGreen^TM H₂O₂ sensor；

产品信息

背景需求

过氧化氢（Hydrogen peroxide, H₂O₂）是一种反映氧代谢副产物，用于许多氧化应激相关态的关键调节剂，参与人体大量的生理和病理活动，比如哮喘、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、神经性衰退疾病和唐氏综合征等，但目前对H₂O₂生成、积累、运输和功能的分子机制仍了解很少，zui大的限制在于缺乏灵敏且特异性H₂O₂探针，用于活细胞研究。目前能得到的H₂O₂反应性探针的缺陷包括1）来自其他ROS比如过氧亚硝基阴离子（ONOO^-）、过氧化基（ROO•）、超氧化物（•O₂^–）的背景荧光干扰；2）对外源活化酶的需求；3）水缺乏水溶性或不兼容于水溶体系；4）以及紫外区域的激发光谱特征等。

产品描述

本ROSGreen^TM H₂O₂ Probe正是克服以上缺陷开发的一款过氧化氢（H₂O₂）选择性探针。探针本身无荧光，可见光区域内无吸收峰。一旦接触H₂O₂，瞬间激发荧光增加并伴随可见波长吸收带的生成（Ex/Em= 490/514nm）。因其二元的吸收/发射荧光反应，此探针具有较大的动力学范围。与相似的ROS比如O₂^–，NO，或OCl^-相比，ROSGreen^TM H₂O₂ Probe对H₂O₂呈现出＞100倍（100-fold）的选择性。

注意事项

1）   本品的DMSO储存液需分装成单次用量后，-20ºC避光保存，避免反复冻融。所有工作液现配现用。

2）   整个操作过程中注意避光。

3）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【详见懋康内容】

1、   储存液制备

将低温保存的产品从冰箱取出，置于室温回温至少20min。低速离心3-5min。之后往瓶内加入适量无水DMSO充分溶解配成2~5mM储存液（比如，1mg ROSGreen^TM H₂O₂ Probe（Mw: ~ 600）加入333μl DMSO，充分溶解混匀后即得到5mM储存液）。按照单次用量分装冻存，避免反复冻融，至少3个月稳定。

2、   工作液准备

正式实验前，或取粉末按照【储存液制备】用DMSO溶解，或于室温融化一管DMSO储存液。

2.1 对于溶液H₂O₂测定，按照2~20μM工作液浓度制备2×工作液，用20mM Hepes缓冲液或其他缓冲液（pH 7.0）稀释储存液。工作液现配现用。建议使用5μM终浓度的ROSGreen^TM H₂O₂ Probe，测定溶液体系中H₂O₂浓度。

2.2 对于细胞H₂O₂测定，按照2~20μM工作液浓度制备1×工作液，用含20mM Hepes缓冲液的HBSS，pH 7.0 或PBS稀释储存液。工作液现配现用。

3、   上清液H₂O₂测定

4、   活细胞H₂O₂测定

染色示例

图1. Costar 黑色96孔培养板内CHO-K1活细胞用ROSGreen^TM H₂O₂ Probe的染色图。图A：对照细胞；图B：用H₂O₂（100μM）处理5min后的细胞；

相关产品

— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信"的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。

ROSGreen过氧.*化氢荧光探针 细胞生物学

ROSGreen过氧.*化氢荧光探针 细胞生物学