在做ELISA试剂盒实验过程中，难免会遇到各种不同的问题，比如标准曲线不好，试剂盒的回收率，假阴性，假阳性，实验的重复性不好等等。ELISA试剂盒现在就来一一解答用户们在实验过程中遇到的各种疑问！
ELISA试剂盒曲线问题：
1.OD值不正常
试剂盒未回温，试剂盒回温到25℃
温度控制不好，控制正确温度
孵育时间不准确，控制孵育时间
洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加，洗涤4-5次，每孔250ul，然后拍干
阳光直射，对着风直接吹，避风避
酶标仪的波长错误，酶标仪的波长450nm
抗体的稀释错误，正确的稀释抗体
水质问题，用娃哈哈矿泉水代替
2.白 板
洗涤液配制错误，正确的配制洗涤液
少加液体（错加液体），正确的步骤加液体
3.ELISA试剂盒无 梯 度
标准品也污染，换标准品点板
OD值不正常，控制温度时间在做一次
人为点板，不要点板
4.线 性 不 好
OD值不正常，控制温度时间在做一次
ELISA试剂盒回收率
1.空白管阳性高
样本本身就是阳性样本，换阴性样本做回收率
空白管在实验中被污染，实验中防止交叉污染
水质原因用，娃哈哈矿泉水代替
2.偏 高
添加量不准确，的添加量
添加浓度不适合，ELISA试剂盒添加合适的浓度
取液吹干量多，准确的取液吹干
取到其它相层液体，取需用相吹干
复溶液未稀释或加入量少，正确的稀释复溶液
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3.偏 低
添加量不准确，的添加量
添加浓度不适合，添加合适的浓度
取液吹干量少，准确的取液吹干
复溶液稀释错误或加入量多，正确的稀释复溶液
beta COP β衣被蛋白抗体
Caspase 4+Caspase 11 半胱胺酸蛋白酶4/11抗体
C1orf187 1号染色体开放阅读框187抗体
C9orf61 9号染色体开放阅读框61抗体
CTBP2 C末端结合蛋白2抗体
C21ORF13 21号染色体开放阅读框13抗体
Coronin 3 冠蛋白3抗体
CNTD 细胞周期蛋白N端结构域蛋白1抗体
CH25H *25羟化酶抗体
Caspase-1 p20 天冬氨酸-*特异性蛋白酶家族抗体
Calneuron 1 钙营养蛋白1/钙结合蛋白8抗体
CABP5 钙结合蛋白5/3抗体
SLC7A5 CD98轻链抗体
CLPS 胰辅脂酶抗体
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