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上海邦景实业有限公司
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阅读:564发布时间:2016-3-21
原理ELISA试剂盒
根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律,某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位,液层厚度为1cm时,α为该物质的吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。如果溶液中有数种吸光物质,则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。这就是吸光度的加和性。今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量,只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A,并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰,所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的zui大吸收峰。
实验步骤
1. 取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料,擦净组织表面污物,剪碎(去掉中脉),混匀。2. 称取剪碎的新鲜样品0.2g,共3份,分别放入研钵中,加少量石英砂和碳酸钙粉及2~3ml95%乙醇,研成均浆,再加乙醇10ml,继续研磨至组织变白。静置3~5min。3. 取滤纸1张,置漏斗中,用乙醇湿润,沿玻棒把提取液倒入漏斗中,过滤到25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次,zui后连同残渣一起倒入漏斗中。4. 用滴管吸取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。zui后用乙醇定容至25ml,摇匀。5. 把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95%乙醇为空白,在波长665nm、649nm下测定吸光度。
四、实验结果计算:将测定得到的吸光值代入下面的式子:Ca=13.9665-6.88A649;Cb=24.96A649-7.32A665。据此即可得到叶绿素a和叶绿素b的浓度(Ca、Cb:mg/L),二者之和为总叶绿素的浓度。zui后根据下式可进一步求出植物组织中叶绿素的含量:
叶绿素的含量(mg/g)= [叶绿素的浓度×提取液体积×稀释倍数]/样品鲜重(或干重)。
C9ORF43 9号染色体开放阅读框43抗体
Chitinase 3 like protein 3 几丁质酶3样蛋白3抗体
CMTM2 趋化素样因子超家族成员2抗体
CKLFSF2 isoform 1 趋化素样因子超家族成员2亚型1抗体
C18orf1 18号染色体开放阅读框1抗体
COX7A2 *氧化酶VIIA亚型2抗体
CACNA1F 钙离子通道a1F亚型抗体
Calcineurin B 钙调磷酸酶B亚基B1抗体
CaMKK1 钙调蛋白激酶激酶α抗体CaMKKα
CREB3L3 环腺苷酸应答元件结合蛋白H抗体
Phospho-CHEK1 磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体
Calpain 12 钙激活蛋白酶12抗体
C20orf134 20号染色体开放阅读框134抗体
CD239 B细胞粘附分子CD239抗体
CPB2 胰羧肽酶B2抗体
CERKL 视网膜色素变性蛋白26抗体
CROT 过氧化物酶体肉碱酰基转移酶抗体
ELISA试剂盒
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