小 鼠 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 酶 联 免 疫 分 析剂 试 剂 盒 使 用 说 明 书
本 试 剂 盒 仅 供 研 究 使 用 。
检 测 范 围 检 测 范 围 检 测 范 围 检 测 范 围 ： ： ： ： 9 6 T
1 . 2 n g / m l - 4 5 n g / m l
使 用 目 的 使 用 目 的 使 用 目 的 使 用 目 的 ： ： ： ：
本 试 剂 盒 用 于 测 定 小 鼠 血 清 、 血 浆 及 相 关 液 体 样 本 中 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 含 量 。
实 验 原 理 实 验 原 理 实 验 原 理 实 验 原 理
本 试 剂 盒 应 用 双 抗 体 夹 心 法 测 定 标 本 中 小 鼠 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 水 平 。 用 纯 化 的 小 鼠 三 磷
酸 肌 醇 ( I P 3 ) 抗 体 包 被 微 孔 板 ， 制 成 固 相 抗 体 ， 往 包 被 单 抗 的 微 孔 中 依 次 加 入 三 磷 酸 肌 醇
( I P 3 ) ， 再 与 H R P 标 记 的 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 抗 体 结 合 ， 形 成 抗 体 - 抗 原 - 酶 标 抗 体 复 合 物 ， 经 过
彻 底 洗 涤 后 加 底 物 T M B 显 色 。 T M B 在 H R P 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化
成 zui 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长
下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 通 过 标 准 曲 线 计 算 样 品 中 小 鼠 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 浓 度 。
试 剂 盒 组 成 试 剂 盒 组 成 试 剂 盒 组 成 试 剂 盒 组 成
1 3 0 倍 浓 缩 洗 涤 液 2 0 m l × 1 瓶 7 终 止 液 6 m l × 1 瓶
2 酶 标 试 剂 6 m l × 1 瓶 8 标 准 品 （ 8 0 n g / m l ） 0 . 5 m l × 1 瓶
3 酶 标 包 被 板 1 2 孔 × 8 条 9 标 准 品 稀 释 液 1 . 5 m l × 1 瓶
4 样 品 稀 释 液 6 m l × 1 瓶 1 0 说 明 书 1 份
5 显 色 剂 A 液 6 m l × 1 瓶 1 1 封 板 膜 2 张
6 显 色 剂 B 液 6 m l × 1 / 瓶 1 2 密 封 袋 1 个
标 本 标 本 标 本 标 本 要 求 要 求 要 求 要 求
1 ． 标 本 采 集 后 尽 早 进 行 提 取 ， 提 取 按 相 关 文 献 进 行 ， 提 取 后 应 尽 快 进 行 实 验 。 若 不 能
马 上 进 行 试 验 ， 可 将 标 本 放 于 - 2 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融
2 ． 不 能 检 测 含 N a N 3 的 样 品 ， 因 N a N 3 抑 制 辣 根 过 氧 化 物 酶 的 （ H R P ） 活 性 。
操 作 步 骤 操 作 步 骤 操 作 步 骤 操 作 步 骤
1 . 标 准 品 的 稀 释 ： 本 试 剂 盒 提 供 原 倍 标 准 品 一 支 ， 用 户 可 按 照 下 列 图 表 在 小 试 管 中 进 行 稀
释 。
4 0 n g / m l 5 号 标 准 品 1 5 0 μ l 的 原 倍 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液
2 0 n g / m l 4 号 标 准 品 1 5 0 μ l 的 5 号 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液
1 0 n g / m l 3 号 标 准 品 1 5 0 μ l 的 4 号 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液
5 n g / m l 2 号 标 准 品 1 5 0 μ l 的 3 号 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液
2 . 5 n g / m l 1 号 标 准 品 1 5 0 μ l 的 2 号 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液
2 . 加 样 ： 分 别 设 空 白 孔 （ 空 白 对 照 孔 不 加 样 品 及 酶 标 试 剂 ， 其 余 各 步 操 作 相 同 ） 、 标 准 孔 、
待 测 样 品 孔 。 在 酶 标 包 被 板 上 标 准 品 准 确 加 样 5 0 μ l ， 待 测 样 品 孔 中 先 加 样 品 稀 释 液 4 0 μ l ，
