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技术文章

人cAMP反应元件结合免疫ELISA分析

阅读:340发布时间:2016-3-21

ELISA试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 cAMP 反应元件结合蛋白(CREB)水平。用纯
化的人 cAMP 反应元件结合蛋白(CREB)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微
孔中依次加入 cAMP反应元件结合蛋白(CREB),再与HRP标记的cAMP反应元件结合蛋白
(CREB)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。 TMB
在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中
的 cAMP 反应元件结合蛋白(CREB)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD
值),通过标准曲线计算样品中人cAMP反应元件结合蛋白(CREB)浓度。
试剂盒组成
1 20 倍浓缩洗涤液 30ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(180ug/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张   
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个

标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间
控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值
大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.  如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中 cAMP 反应元件结合蛋白(CREB)含
量。

CRBN    cereblon蛋白抗体
CTRP5    补体C1q和肿瘤坏死因子相关蛋白5抗体
CUG-BP1    胞苷尿苷鸟苷结合蛋白1抗体
Chordin    原肠胚双向形成相关蛋白抗体
CDC123    细胞分裂周期蛋白CDC123抗体
CLN3    神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN3抗体
CKLFH3    趋化素样因子超家族成员3抗体
CHMP1B    染色质修饰蛋白1B抗体
CIRBP    冷诱导RNA结合蛋白抗体
CLASP1    细胞连接相关蛋白1抗体

ELISA试剂盒


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