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上海抚生实业有限公司
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人结直肠癌细胞；T84特性冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase *储存。
以下是人结直肠癌细胞；T84特性产品信息的认购信息：
细胞名称 人结直肠癌细胞；T84特性
形态特性 上皮样；多角
生长特性 贴壁生长
特征特性 T84细胞来源于一位72岁的男性结直肠癌患者的肺部转移灶；皮下接种至BALB/c裸鼠并连续传代23次后建立该细胞系。在裸鼠身上传代的过程中，该肿瘤仍保持原始的结直肠癌的组织学特性。T84细胞系生长至汇合状态时形成单层细胞，相邻细胞间有紧密连接和细胞桥粒；该细胞有多种肽类激素和神经递质的受体，维持电解质的定向运输；角蛋白阳性。
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
传代方法 1:2~1:4传代；每周2次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：10；D13S317：9；D16S539：10，11；D18S51：17；D19S433：13；D21S11：31；D2S1338：23，26；D3S1358：19；D5S818：12；D7S820：8，10；D8S1179：15；FGA：24；TH01：6，9；TPOX：8，11；vWA：17，18；
同工酶
染色体 51~60
使用权限 A类
细胞种类：
人结直肠癌细胞；T84特性冻存
对培养的细胞进行冻存的方法是将细胞置于含有(DMSO)等冷冻保护剂的*培养基中于液氮中储存。冷冻保护剂可降低培养基的冰点，并可减缓冷却速度吗，大大降低冰晶形成的危险 (冰晶可损伤细胞，导致细胞死亡)。
注：DMSO 可促进有机分子进入组织。操作含DMSO的试剂时，应采用与此类物质安全危害相适应的设备和操作规范，并应按照当地法规处置此类试剂。
细胞冻存指导原则
冻存细胞系以备将来之用时，必须遵守以下原则。与其他细胞培养操作一样，我们建议您严格遵守您所用细胞系附带的操作说明，以便获得结果。
1）在高细胞浓度情况下进行培养细胞的冻存，并且细胞传代次数尽可能少。确保冻存前活细胞百分比至少为90%。请注意冻存条件取决于所用细胞系。
2）细胞应缓慢冷冻，可使用可控制降温速度的低温冰箱或者低温冷冻容器使温度每分钟大约降低1°C。
3）必须使用*的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂
4）将冷冻的细胞于 -70°C 以下温度储存；温度高于 -50°C 时，冷冻的细胞将开始变质。
5）必须使用无菌冻存管储存冷冻的细胞。装有冷冻细胞的冻存管可浸于液氮或者在液氮上方的气相空间内保存
6）必须穿戴个人防护设备。
7）所有与细胞接触的溶液和设备均应为无菌状态。必须采用正确的无菌技术，并且在层流通风橱内进行。
以下是人结直肠癌细胞；T84特性的相关产品：
包装：5 × 105次方（1ml）*心肌成纤维细胞
包装：5 ×105次方（1ml）*心肌细胞
包装：5 ×105次方（1ml）*心肌细胞
包装：5 ×105次方（1ml）*心肌细胞
包装：5 × 105次方（1ml）*心室肌细胞
包装：5 × 105次方（1ml）*心脏微血管内皮细胞
Rabbit Complement 3,C3 ELISA Kit进口/分装
Rabbit high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 进口/分装
Rabbit catecholamine,CA ELISA Kit *
Rabbit Leptospira IgG,Lep IgG ELISA Kit 进口/分装
Rabbit Osteoprotegerin,OPG ELISA Kit 进口/分装
Rabbit Osteopontin,OPN ELISA Kit *
Rabbit bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit *
Rabbit Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit *
Rabbit receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit *
Rabbit nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit进口/原装
Rabbit cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit*
Rabbit Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA Kit *
Rabbit matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA Kit 进口/原装
Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA Kit进口/原装
人结直肠癌细胞；T84特性Phospho-HSP27 (Ser15) 磷酸化热休克蛋白27多克隆抗体 规格 0.1ml*
Phospho-HSL (Ser959+960) 磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶多克隆抗体 规格 0.1ml*
Phospho-HSL (Ser865) 磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶多克隆抗体 规格 0.1ml*
Phospho-HSL (Ser863) 磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶多克隆抗体 规格 0.1ml*
Phospho-HSL (Ser660) 磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶多克隆抗体 规格 0.1ml*
phospho-HSF1(Ser326) 磷酸化热休克因子1多克隆抗体 规格 0.1ml*
phospho-HSF1(Ser307) 磷酸化热休克因子1多克隆抗体 规格 0.1ml*
phospho-HSF1(Ser303) 磷酸化热休克因子1多克隆抗体 规格 0.2ml*
phospho-HRH1(Ser398) 磷酸化组胺受体H1多克隆抗体 规格 0.1ml*
Phospho-HP1(Tyr43) 异染色质蛋白1磷酸化多克隆抗体（果蝇） 规格 1ml*
Phospho-HP1 gamma (Ser93) 磷酸化染色质相关蛋白1-γ多克隆抗体 规格 0.1ml*
phospho-HP1 alpha (Tyr24) 磷酸化异染色质蛋白1多克隆抗体（果蝇） 规格 1ml*
冻存培养基：
人结直肠癌细胞；T84特性冻存细胞时必须使用*的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的*冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型*冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.人结直肠癌细胞；T84特性配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需*培养基重新悬浮细胞。
3.采用*、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低 1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
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