一、elisa试剂盒材料与试剂
1、副结核分枝杆菌亲和层析抗原
2、草分枝杆菌吸收抗原
3、兔抗牛IgG酶标抗体
4、牛副结核病参考阳性血清
5、牛副结核病参考阴性血清
1～5项均由单位供应。
6、器材ELISA板，酶联免疫吸附检测仪、加样器、洗瓶、恒温箱等。
7、试剂及溶液配制同第五节猪瘟ELISA。
二、操作方法
1、抗原包被 以抗原稀释液将副结核亲和层析抗原稀释至50μg/ml,每孔包被0.1ml.部分对照孔以牛血清白蛋白(50μg/ml)包被。
2、血清处理 取待检血清、参考阳性血清、参考阴性血清各0.10ml，加生理盐水0.80ml，加草分枝杆菌吸收抗原0.10ml，混匀，37℃感作1h.取0.10ml，加血清稀释液0.90ml(注意血清稀释液中加牛血清白蛋白，不加犊牛血清)。混匀即可
3、elisa试剂盒正式试验 按表12－4进行。每个样品加2孔，以求OD平均值。
三、结果判定
在对照组成立的前提下， 即参考阳性血清呈棕黄色，参考阴性血清及其它对照孔呈无色或浅黄色， 判定待测结果。
1、目测判定 与参考阳性血清孔颜色相当，即呈棕黄色，判为ELISA阳性(＋)。
2、酶标仪判定(490nm) 以底物溶液对照孔调零，校正参考阳性血清OD值为1.0(或相应规定值)，测定待检孔。当OD≥0.50，判ELISA阳性(＋)；0.40≤OD≤0.49判ELISA可凝(±)；OD<0.40，判ELISA阴性(－)。
过氧化二硫酸钾 Potassium persulfate 7727-21-1
焦硫酸钾;无水重硫酸钾;无水酸性硫酸钾 PotassiuM pyrosulfate;Disulfuric acid dipotassiuM salt;PotassiuM anhydrosulfate;“Anhydrous" potassiuM acid sulfate 7790-62-7
无水硅酸钾 Potassium silicate 1312-76-1
山梨酸钾;清凉茶酸钾;山梨酸钾盐 PotassiuM Sorbate (AS) 24634-61-5
硬脂酸钾;十八酸钾 PotassiuM stearate 593-29-3
酒石酸钾 PotassiuM tartrate;Soluble tartar 921-53-9
硫氰酸钾;硫 PotassiuM thiocyanate;PotassiuM rhodanide;PotassiuM sulfocyanide;Rhocya 333-20-0
硫代硫酸钾 PotassiuM thiosulfate 10294-66-3
草酸钛钾;乙二酸钛钾 PotassiuM titanyl oxalate;PotassiuM oxodioxalatodiaquotitanate(Ⅳ);Titanyl potassiuM oxalate 14402-67-6
钨酸钾 PotassiuM tungstate 7790-60-5
对苯二甲醛;对酞醛 p-Phthalaldehyde;Terephthaldialdehyde;Terephthaldicarboxaldehyde;Benzene-1,4-dialdehyde;Benzene-1,4-dicarboxaldehyde;1,4-Dialdehydobenzene;1,4-DiforMylbenzene 623-27-8
elisa试剂盒对苯二甲酸;对酞酸;松油苯二甲酸 p-Phthalic acid;Benzene-1,4-dicarboxylic acid;Tephthol 100-21-0
对苯二甲酰氯;二氯化对苯二甲酰;对苯二酰氯;对苯二酰二氯;对酞酰氯;1,4-苯二酰氯 p-Phthaloyl chloride;Terephthalic chloride;1,4-Benzenedicarbonyl chloride 100-20-9
