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豚鼠胰*α2(AMY2)分析检测试剂盒原理和标本的采集与保存

阅读:203发布时间:2019-01-25

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豚鼠胰*α2(AMY2)分析检测试剂盒   原理:

ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA竞争法。

豚鼠胰*α2(AMY2)分析检测试剂盒     标本的采集与保存

1、血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4oC 过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
2、血浆:用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的 30 分钟内于 2-8oC 1000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
3、组织匀浆:

1)取适量组织块,于预冷 PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆);

2)可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果:首先将组织块移入玻璃匀浆器,加入 5-10mL 预冷 PBS 进行充分研磨,该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温;反复冻融法可重复 2 次)。
3)将制备好的匀浆液于 5000×g 离心 5 分钟,留取上清即可检测。
4、其它生物标本:请 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。


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