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脂蛋白磷脂酶a2试剂盒的操作步骤和技术原理

阅读:453发布时间:2018-12-28

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脂蛋白磷脂酶a2试剂盒

操作步骤:

各试剂在使用前平衡至室温。

1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外,余孔分别加标准溶液或待测样品100ul,轻轻混匀,37℃,120分钟。

2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。

3. 每孔加检测溶液A工作液 100ul,37℃,60分钟。洗板3次,350ul/每孔,甩干。

4. 每孔加检测溶液B工作液 100ul,37℃,60分钟,洗板5次,甩干。

5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显30分钟。

6. 依序每孔加终止溶液50ul,终止反应。用酶联仪在910nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 

注:以上操作步骤为参考,具体操作步骤以ELISA试剂盒说明书为准。

脂蛋白磷脂酶a2试剂盒 

技术原理:
(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。


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