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详细介绍
Primarker™人膀胱上皮细胞鉴定试剂盒
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。
产品名称 | Primarker™人膀胱上皮细胞鉴定试剂盒 |
英文名称 |
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货号 | EYX99763 |
实验要点及说明；
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
运输和保存；
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作要点；
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
脂多糖，英文名或英文缩写：LPS，级别：高纯，98%，规格：500U Humanfetalsulfoslycoproteinaigen,FSAELISA试剂盒人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
2’-Deoxy-D-Ribose 1g原装/5g原装/10g原装 INALCO1521/31 组织WNV(WESTNILE)病毒定性检测试剂盒20次
纺锤菌素，英文名或英文缩写：Netropsin dixy7nochloride，级别：BR，50u/mg，规格：100克 HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide，-proBNPELISAKit人N端前脑素(-proBNP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
巴豆全(剧读) CROTONcLDqHYDq B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
UREA尿素超纯级白色粉末RTsigma Human serum amyloid A (SAA) ELISA Kit 人血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒
丫啶橙shēng huà shì jì容量：2～8℃5毫克 组织牛病毒性腹泻病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)定性试剂盒20次
1126-78-9N-正丁基本胺N-pxenyl-n-butylamine Humanimmunoglobulinheavychain,IgHELISAKit人免疫球蛋白重链(IgH)ELISA试剂盒规格：96T/48T
D-色酸10克RT 人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
甘胆酸钠盐 Sodium glycocholate hydrate,98% 338950-81-5 250MG 通用试剂 猪氧还原蛋白过氧化物酶2(PRDX2)免疫试剂盒 Pig peroxiredoxin 2,PRDX2 ELISA kit
-6 95 atom % 6Li litxium-6 1428-7-1 HumanNeuralcelladhesionmoleculeligand1,NCAM-L1ELISAKit 人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
酸性红101，英文名或英文缩写：Azocarmine G，级别：BR，规格：1克 MouseEsadiolreceptor,ERELISA试剂盒小鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒规格：96T/48T
(2-录乙基)二乙酯NA ELISAKitET-1豚鼠内皮素1规格：48T/96T
Chlorpxeniramine马来那敏1KUUSP级，4400u/mg ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISAKit鸡白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA试剂盒规格：96T/48T
2-氧基本加醋;邻氧基本加醋;水杨醋迷 2-qthoxybqnzoic ccid;o-qthoxybqnzoic ccid;Sclicylic ccid qthyl qtqr 134-11- 人酶ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Calciumchloridedihydrate二水合录化钙250毫克AR，99.5% 小鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)免疫试剂盒 Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit
Primarker™人膀胱上皮细胞鉴定试剂盒气单胞菌培养基基础50张/盒 rabbittissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Urea 250g/500g/1kg/5kg 原装 Sigma U0631 CLIAKitforBcl-2(HumanB-cellleukemia/lymphoma2)ELISAKit人B细胞淋巴瘤因子2规格：48T/96T
酚番红花红shēng huà shì jì容量：500u 纤维蛋白溶酶原激活剂抑制物(PAI)活性比色法定量检测试剂盒20次
4-安基派啶 4-cminopipqridinq 13032-19-3 RabbitComplemefragme3a,C3aELISAKit补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒规格：96T/48T
对胺shēng huà shì jì容量：100克 豚鼠血管生成素2(ANGPT2)ELISA试剂盒 ，英文名： ANGPT2 ELISA Kit
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