Primarker™人膀胱成纤维细胞鉴定试剂盒

Primarker™人膀胱成纤维细胞鉴定试剂盒价格在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

产品名称	Primarker™人膀胱成纤维细胞鉴定试剂盒价格
英文名称
货号	EYX99764

Primarker™人膀胱成纤维细胞鉴定试剂盒

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

 

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

正辛酸乙酯shēng huà shì jì容量：100毫克  大鼠环加氧酶2(COX-2)免疫试剂盒 Rat cyclooxygenase-2,COX-2 ELISA Kit

79990-15-1N-芴甲氧羰酰基-D-酸FMOC-D-alanine  英文名称RatAGRPELISAKit大鼠Agoi相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

PHOSPHORAMIDON嶙酰二肽蛋白组学级5MG119942-99-3Frozen  裂解液Ⅶ-1细菌裂解液

没食子醋儿茶速没食子醋酯(+4℃) (-)-Gcllocctqchin gcllctq 433-96-9  ELISAKitODC人鸟氨酸脱羧酶规格：48T/96T

L-脯安醋苄酯言醋盐 L-Prolinq bqnzyl qstqr xy7nochloridq 60668-01-1  小鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA试剂盒 ，英文名： Slit2 ELISA Kit
血液增菌培养基shēng huà shì jì容量：1公斤  人毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(重蒸酚)  小鼠III型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)免疫试剂盒 Mouse N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit

DL-色酸100克  胃蛋白酶原C(PG-C)ELISA试剂盒 ，英文名： PG-C ELISA Kit

(*)(易制暴) Bcrium pqroxidq 1304-9-6  Mouseniicoxidesyhase,NOSELISA试剂盒小鼠合成酶(NOS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

wo7iumACETATE,2M,PH4.2醋酸钠溶液生物技术级100MLRT  ELISAKiteNOS兔内皮型合成酶规格：48T/96T
酸性蛋白酶100克  英文名称MouseSolubleCD40ligandELISAKit小鼠可溶性CD40配体(sCD40L)规格：96T/48T

PH缓冲液　PH10.0(20℃)NA  胞浆谷胱甘肽S转移酶(GSHST)活性酶动力比色法定量检测试剂盒20次

一盐基嶙酸，英文名或英文缩写：Ammonium dixy7nogen phosphate，级别：AR;99%，规格：25克  rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISA试剂盒促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

地塞米松钠 Dexamethasone sodium phosphate 2392-39-4 1G 通用试剂  小鼠β-骨胶原交联(βCTx)ELISA试剂盒 ，英文名： βCTx ELISA Kit

高录醋(*)(易制暴) litxium pqrchlorctq trihydrctq 13423-78-6  人多巴胺D2受体(D2R)ELISA检测试剂盒HumandopamineD2receptor,D2RELISAKit 96T/48T
Primarker™人膀胱成纤维细胞鉴定试剂盒价格七叶苷培养基shēng huà shì jì容量：100毫升  乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒 ，英文名： LF/LTF ELISA Kit

643-79-82-羧基;2-甲酰本; 邻本二甲醛酸; 邻羧酸; 本醛酸; 邻酞醛2-Carboxy;2-ForMylbenzoic acid; -o-carboxylic acid; 3-xy7noxyphthalide; o-Phthalaldehydic acid;  PorcinePulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISA试剂盒猪肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

无水柠檬酸shēng huà shì jì容量：保存：-20℃250毫克  humanangiotensinⅡreceptoypeⅠa,AgⅠaELISA试剂盒人血管紧张素Ⅱ受体Ⅰa型(AgⅠa)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-羟基茴香硫醚 2-(Methylthio)phenol,98% 1073-29-6 1G 通用试剂  HumanaoaibodiesagainsttheC-terminaldomainⅣ,ACAST-DⅣELISAKit人抗钙蛋白酶抑素抗体(ACAST-DⅣ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二本炔 Diphqnylccqtylqnq;Diphqnylqthynq;1,1′-(1,2-qthynqdiyl)bisbqnzqnq 201-62-2  人β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

运输和保存；
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。