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1-磷酸鞘氨醇检测试剂盒​实验步骤

阅读:826          发布时间:2022-1-12

1-磷酸鞘氨醇检测试剂盒实验步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温;试剂或样品配制时,均需充分混匀,并尽量避免起泡。


1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。


2.弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。


3.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。


4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。


5.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。


6.每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。


7.每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。


8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。


9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。

Phospho-A Raf(Ser299)磷酸化A-Raf抗体

AMPD3红细胞腺苷脱氨酶3抗体

ABP雄激素结合蛋白抗体

ALR肝再生增强因子抗体

Amyloid Precursor ProteinAPP/ABPP淀粉样肽前体蛋白抗体

AFP(A2)甲胎蛋白单克隆抗体(包被)

AFP(A4)甲胎蛋白单克隆抗体(检测)

ARFIP1 ADP核糖基化因子结合蛋白1抗体

AHR芳香烃受体抗体

ATRN吸引素抗体

ABCA1腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体

AKT2蛋白激酶B2

Angiopoietin 2血管生成素2抗体

Aromatase芳香化酶/细胞色素P450/雌激素合成酶抗体

Adenosine Receptor A2a腺苷A2A受体抗体

AKAP95蛋白激酶A锚定蛋白95抗体

ASBT顶膜钠依赖性胆盐转运体蛋白抗体

ADAM8去整合素样金属蛋白酶8抗体

AADACL3芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体

ACN9ACN9蛋白抗体

ADAR1 (N-terminus)双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体(N端)

AMPK alpha 2腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体


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