技术文章
多聚甲醛固定微生物样品原理阐述
阅读:3747 发布时间:2021-6-22多聚甲醛固定微生物样品原理:形成分子间的交联,影响蛋白构型而使之固定。 优点:形态结构保存好,且穿透性强,组织收缩少。
缺点:
甲醛放置过久可氧化为甲酸,使溶液pH降低,影响染色;
醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍;
分子间交联形成的网格结构可能部分或*掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露。可造成假阴性的染色结果。 注意事项:
缩短固定时间,降低固定温度(4°C),为此组织块不宜过厚。
改用中性缓冲福尔马林,以pH值7.2~7.4 0.01mol/L的磷酸盐缓冲液配制成10%甲醛固定液,减少固定液pH的变化。
固定后充分水洗以减少分子间交联。
切片在作免疫组化染色前,先经预处理使抗原再现(抗原修复)。
智慧城市网