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多聚甲醛固定微生物样品原理阐述

阅读:3747          发布时间:2021-6-22

多聚甲醛固定微生物样品原理:形成分子间的交联,影响蛋白构型而使之固定。    优点:形态结构保存好,且穿透性强,组织收缩少。  

  缺点: 

甲醛放置过久可氧化为甲酸,使溶液pH降低,影响染色; 

醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍; 

分子间交联形成的网格结构可能部分或*掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露。可造成假阴性的染色结果。     注意事项: 

缩短固定时间,降低固定温度(4°C),为此组织块不宜过厚。
改用中性缓冲福尔马林,以pH值7.2~7.4 0.01mol/L的磷酸盐缓冲液配制成10%甲醛固定液,减少固定液pH的变化。 

固定后充分水洗以减少分子间交联。 

切片在作免疫组化染色前,先经预处理使抗原再现(抗原修复)。 

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