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技术文章

ELISA试剂盒的真假辨别

阅读:1045          发布时间:2016-10-12

Ⅰ. 利用干扰实验即可辨别ELISA试剂盒是否检测目的抗原,方法如下:

    (1)将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵

育液

    (2)37℃孵育15分钟后,代替原试剂盒中的检测抗体

    (3)后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物

    (4)实验完毕后,检测其标准曲线,如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配,试剂

盒检测抗体针对的是非目的抗原,该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。

    (5)如果标准曲线无线性,则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰,影响了其实际试剂盒抗体的

检测作用,则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。

    Ⅱ.如果购买了两盒同一公司的ELISA试剂盒A和B,利用交叉实验即可辨别ELISA试剂盒是否造假,方法如下

    (1)    取出购买的试剂盒A的包被板两条。

    (2)    一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线。

    (3)    另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线。

    (4)    后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物。

    (5)    实验完毕后,检测两条标准曲线,如果两条标准曲线一致则说明两个ELISA试剂盒检测的同一个指

标而非A和B,即该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。

    (6)    如果两条标准曲线不一致则说明两个ELISA试剂盒检测的不同指标,试剂盒A只能检测A,不能检测

B,即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。
 

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