ELISA试剂盒 文献报道81 %的ADSCs克隆至少向一个谱系分化, 52 %的ADSCs克隆向2个或更多的谱系分化，与ADSCs是一种多能成体干细胞而不是混合的专能祖细胞的假说相符合[5]。通过体外培养发现[6]，ADSCs呈梭形生长，胞浆和核仁丰富，呈平行排列或漩涡样生长。呈现稳定一致的倍增周期，均约55~60 h。ADSCs体外培养时，分裂增殖能力强，无明显的生长滞缓期，第3天进入对数生*，第6天达到生长峰值，第7天后进入平台期。传15代后，细胞的生长增殖能力无明显下降。
βgal细胞染色是研究细胞衰老中一种常用的实验手段，pH6.0时衰老的细胞会呈现βgal阳性染色。以此技术检测ADSCs在传代过程中的衰老程度，结果发现，第1代ADSCs均染色阴性，第7~l5代ADSCs中才出现阳性染色细胞，随代次增加阳性染色细胞数虽有所增加，但第l5代时也仅约5 %。这提示ADSCs不但具有较强的再生能力，而且兼有低衰老性特征，有望成为组织工程中理想的干细胞来源。
ELISA试剂盒采用流式细胞仪分析ADSCs的表面标志，发现CD9、CD10、CD13、CD29、CD44、CD71、CD90、CD105（SH2）、SH3、CD166均为阳性，其中CD105、CD166为间充质干细胞相对特异性标志，而CD31、CD34、CD45等造血细胞标志物和人类主要组织相容抗原Ⅱ型HLADR均为阴性，上述细胞表型与骨髓来源的间充质干细胞基本相同[7，8]。
二、ADSCs与骨髓干细胞的异同点
De Ugarte等[9]以及李公宾等[10]通过分别获取骨髓与脂肪组织，并对ADSCs和骨髓间充质干细胞（bone marrowderived mesenchymal stem cells, BDMSCs ）进行了比较，初步证明二者均源自中胚层,无论在细胞生长增殖方式、多向分化的潜能、外源基因的导入还是免疫原性等都无显著差异，但是两者仍有一定区别。其差异主要表现在：⑴来源及获取方法:BDMSCs需要骨髓穿刺，经密度梯度离心方法获得，量少，约1×l05个骨髓间质细胞方能获取1个间充质干细胞，而且痛苦大;ADSCs来自脂肪组织抽吸物，简单消化、离心等即可获取，量大，300 ml脂肪抽吸物中一般可得到2×108～6×108 个细胞，痛苦小。⑵细胞表面抗原不同：ADSCs为CD49+,CD106;BDMSCs为CD49,CD106+ 。⑶体外培养方式不同：BDMSCs体外培养时，对血清质量与来源要求较高，但ADSCs细胞体外增殖和分化时无特别要求。
三、ADSCs多向分化能力诱导及检测指标
ELISA试剂盒1.定向分化为脂肪细胞： 以Eagle细胞培养基（DMEM），加入诱导剂胰岛素、1甲基3异丙基黄嘌呤、 或*、*或噻唑烷二酮（一种能活化配体的过氧化物酶增强剂）、泛酸、*和三碘甲腺原氨酸进行诱导培养。7～10 d后，经油红O或尼罗河红染色阳性，反转录聚合酶链式反应（RTPCR）技术检测到脂蛋白酶的表达，并确定其分泌脂蛋白瘦素[11]。
2.定向分化为软骨细胞： 三维环境的培养有利于朝软骨方向分化并且维持其表型。其诱导可采用微团培养的方式[12]，同时培养基中加入转化生长因子（TGFβ1）、胰岛素、转铁蛋白等，6 d后加入抗坏血酸二磷酸盐，促使细胞向软骨细胞的分化。1周后光镜下可见到白色的软骨结节，采用阿蓝染色可观察到软骨组织所*的硫酸蛋白聚糖表达，免疫组织化学可检测到结节中的Ⅱ型胶原以及硫酸角质素、*的表达，RTPCR技术可检测到软骨胶原的表达。魏义勇等[13]也通过实验证明，TGFβ1和骨形成蛋白2（BMP2）具有诱导脂肪干细胞向软骨细胞定向分化的作用。
