DIY夹心法ELISA试剂盒常见技术指南：
1、选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对；若选择两个单抗，必须识别不同表位的抗体；从同一家公司选择抗体对。
2、ELISA试剂盒实验中为了确定*信号和zui低背景应将捕获抗体（0.5-4μg/ml）和检测抗体（0.25-2μg/ml）在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时，应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
3、标准品的配制：对于每种细胞因子应仔细阅读说明书，注意每批的细节。ELISA试剂盒在使用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。
4、一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml 到15pg/ml。可利用标准的ELISA试剂盒操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
5、为了优化灵敏度，建议过夜孵育标准品和标本。
6、若使用过氧化物酶作为显色系统，应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
7、当测定混合液体中的抗原时，如血清，建议在标本稀释液中加不相干的Ig.Galectin 1 半乳糖凝集素1抗体
phospho-IKK gamma (Ser31) 磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗体
Phospho-IKK alpha (Thr23) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α/IKK α 抗体
phospho-IKK beta(Tyr199) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗体
phospho-IKK beta(Tyr188) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗体
phospho-IKK alpha (Tyr463) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗体
phospho-IKK gamma (Ser376) 磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗体
phospho-IKK beta(Ser466) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗体
IFI6 干扰素alpha诱导蛋白6抗体
IL-17E/IL-25 白介素-17E抗体
phospho-IRS-1(Ser307) 磷酸化胰岛素受体底物p-IRS-1/2抗体
IARS2 tRNA异*连接酶抗体
Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗体
IFIT3 干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白3抗体
IFIT5 干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白5抗体
IFITM2 干扰素诱导跨膜蛋白2抗体
