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人产肠毒素大肠杆菌ST酶联免疫分析

阅读:298发布时间:2014-12-18

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    上海丰寿试剂有限公司

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人ELISA试剂盒使用目的:

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中产肠毒素大肠杆菌ST表达。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人产肠毒素大肠杆菌ST表达。用纯化的人产肠毒素大肠杆菌ST抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中产肠毒素大肠杆菌ST相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的产肠毒素大肠杆菌ST抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中人产肠毒素大肠杆菌ST的存在与否。

人ELISA试剂盒操作步骤

编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,

温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 
温育:操作同3。
洗涤:操作同5。
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

人ELISA试剂盒保存条件及有效期

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月


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