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Western Blot染色的选择

阅读：361发布时间：2016-11-3

Western Blot染色的选择

OO.Western Blot哪种染色好？
解答：（1）阴离子染料是zui常用的，特别是氨基黑，脱色快，背景低检测极限可达到1.5μg，考马虽然与氨基黑有相同的灵敏度，但脱色慢，背景高。丽春红S和快绿在检测后容易从蛋白质中除去 ，以便进行随后的氨基酸分析。缺点是：溶剂系统的甲醇会引起硝化纤维素膜的 皱缩或破坏。不能用语正电贺的膜。灵敏度低。
（2）胶体金，灵敏度高，检测范围可到pg级，但染色比稳定。
（3）*化灵敏度位于1、2之间，可用于任何一种膜。

7.参照的疑问

PP.是否Western Blot实验半定量一定要加ACTIN内参？
解答：对于发表文章的实验加内参，实验严谨。

.用BANDSCAN分析结果行吗？
解答：分析一般的结果没问题。

RR.核内抗原Western Blot内参选择什么合适？
解答：可以选用组蛋白，组蛋白在细胞核中的表达是很稳定的，有很多都可以当成内参，在网上查查就可以选出你要的内参。

SS.转膜时采用电流是否比电压准确，是否根据0.8mA/cm2，一般1小时左右？
解答：不是的， 半干法*用恒流，一般根据目的蛋白的大小来确定电流和时间。

TT.做半定量人卵巢癌细胞系的Western Blot，内参B-actin，GAPDH，那个好？
解答：选用beta-actin就可以。


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