GGTase I抑制剂(GGTI298) 返回列表页

中文名称：GGTase I抑制剂(GGTI298)

英文名称：GGTI298

产品规格：1mL(10mM)|500ug|1mg|5mg

产品货号：BJ-01X8207

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备F-12K培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

细胞培养方法：

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

人 CD2 基因全长ORF克隆人/苯丙酸去(NP)免疫试剂盒进口、组装

人 CD3D 基因全长ORF克隆人本周蛋白(BJP)免疫试剂盒进口、分装

人 CD8A 基因全长ORF克隆人胞质动力蛋白(CD)免疫试剂盒现货供应

人 ABCB7 基因全长ORF克隆人胞外超氧化物歧化(SOD3)免疫试剂盒*直销

人 CD1C 基因全长ORF克隆人胞浆型磷脂A2-α(cPLA2-α)免疫试剂盒进口、组装

人 CD3E 基因全长ORF克隆人包虫抗体IgG 免疫试剂盒进口、分装

人 CLEC1B 基因全长ORF克隆人膀胱肿瘤抗原(BTA)免疫试剂盒现货供应

人 NEK3 转录变体2 基因全长ORF克隆人膀胱癌抗原(UBC)免疫试剂盒*直销

人 TrkA / NTRK1 基因全长ORF克隆人伴侣蛋白10(CPN10)免疫试剂盒进口、组装

人 SCARB1 基因全长ORF克隆人半乳糖凝集素-7(Gal-7)免疫试剂盒进口、分装

人 Podoplanin 基因全长ORF克隆人半乳糖(Galactose)免疫试剂盒现货供应

GGTase I抑制剂(GGTI298)钾矾明胶包被液  100ml  100µL 山羊抗小鼠IgG(H+L), 碱性标记 Goat Anti-Mouse IgG(H+L),AP Conjugate -20℃保存

多聚赖氨酸溶液(10×PLL,1mg/ml,RNase free)  10ml  2 ug pBI121-GFP pBI121-GFP 低温运输，-20℃保存

多聚赖氨酸溶液(1×PLL,0.1mg/ml,RNase free)  50ml  50mL 通用洗柱液  

多聚赖氨酸溶液(10×PLL,1mg/ml,无菌)  10ml  2 ug pGC- 1 pGC- 1 低温运输，-20℃保存

多聚赖氨酸溶液(1×PLL,0.1mg/ml,无菌)  50ml  液体硫乙醇酸盐培养基（不含琼脂） Thioglycollate Medium(without Agar) 250g

多聚赖氨酸溶液(10×PLL,1mg/ml)  10ml|50ml  1瓶 BS-C-1细胞株 BS-C-1 低温运输和保存

多聚赖氨酸溶液(1×PLL,0.1mg/ml)  50ml  胰蛋白胨大豆琼脂颗粒 TSA Agar 250g

SA缓冲液(5×,pH7.4)  100ml|500ml  100U Pfu DNA聚合 Pfu DNA Polymerase  -20℃保存

SA缓冲液(1×,pH7.4)  500ml  胰月示-亚硫酸盐-环琼脂基础（TSC） Tryptose Sulfite Cycloserine Agar Base 250g

Tris-Maleate缓冲液(1mol/L,pH6.5-8.5)  100ml|500ml  20次 酵母电转感受态细胞制备试剂盒 Yeast Electro Competent Cell

 Preparation Kit 常温

Tris-Maleate缓冲液(0.2mol/L,pH5.08-8.45)  500ml  2 ug pNFAT-TA-Luc pNFAT-TA-Luc 低温运输，-20℃保存

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。

8、结果分析

a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)