伴刀豆球蛋白A(ConA)ELISA试剂盒作为一种分析检测试剂,每种试剂都有其反应模式。其酶标仪的性能稳定与否,决定结果的可靠度。为保证其可靠度,酶标仪应定期进行保养、校正。因各种酶标仪性能有所不同,使用中应详细阅读说明书。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
900ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
450ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
225ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
112.5ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
56.25ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
我司提供各种种属、各种系列ELISA试剂盒,仅适用于科研,不适用于临床诊断,公司提供免费科研ELISA试剂盒代测服务,咨询或咨询客服。
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