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抗原修复
在组织染色标本的制备过程中,抗原可被固定液修饰。抗原经常在其游离的氨基基团被修饰,由于游离的氨基基团常是细胞结构的主要部分,因而常被其他分子所掩盖。此外,固定方法可使蛋白抗原高度变性。
抗原修复法试图克服上述改变。通过修饰可以打破局部障碍,以便抗体进入,并且使蛋白抗原修复。通常使用的方法包括用限制性蛋白酶处理,或在微波炉或加压蒸煮器中加热处理。方法的正确选择将随着抗原和抗体的不同而各异。因此,可通过预试验选择合适的方法。
抗原修复的作用机制尚不清楚,可能与交联的减少和钙离子螯合有关。悬于EDTA缓冲液中在微波炉或加压蒸煮器中加热的方法似乎zui为有效。应尽可能地避免直接采用抗原修复方法,因为这些方法可能引起人为的假阳性染色。
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