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大鼠ELISA检测试剂盒双抗体夹心法是检测抗原常用的方法，操作步骤如下：
1、将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。
2、加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
3、加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
4、加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。
根据同样原理，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物，即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。
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