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上海邦景实业有限公司
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阅读:206发布时间:2015-03-05
上海邦景实业有限公司
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P38蛋白激酶(P38MAPK)ELISA试剂盒说明书
本试剂仅供研究使用 标本:体液
P38蛋白激酶(P38MAPK)ELISA试剂盒说明书试验原理:
BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和*标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
P38蛋白激酶(P38MAPK)ELISA试剂盒说明书自备材料
1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
P38蛋白激酶(P38MAPK)ELISA试剂盒说明书操作注意事项
1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
P38蛋白激酶(P38MAPK)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法
1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。
2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
P38蛋白激酶(P38MAPK)ELISA试剂盒说明书操作步骤
1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9.在450nm波长处测定各孔的OD值。
局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。
P38蛋白激酶(P38MAPK)ELISA试剂盒说明书性能
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
P38蛋白激酶(P38MAPK)ELISA试剂盒说明书结果判断与分析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
HSP-70 鸡热休克蛋白70 规格: 48T/96T
Hsp-60 鸡热休克蛋白60 规格: 48T/96T
HSP-40 鸡热休克蛋白40 规格: 48T/96T
HSP-20 鸡热休克蛋白20 规格: 48T/96T
IgG 鸡免疫球蛋白G 规格: 48T/96T
IgE 鸡免疫球蛋白E 规格: 48T/96T
IgA 鸡免疫球蛋白A 规格: 48T/96T
Irna 鸡免疫核糖核酸 规格: 48T/96T
IgY 鸡卵黄免疫球蛋白 规格: 48T/96T
JE IgG 鸡流行性乙型脑炎抗体IgG 规格: 48T/96T
sEPCR 鸡可溶性血管内皮细胞蛋白C受体 规格: 48T/96T
sICAM-1 鸡可溶性细胞间粘附分子1 规格: 48T/96T
sE-selectin 鸡可溶性E选择素 规格: 48T/96T
AT-Ⅲ 鸡抗*Ⅲ抗体 规格: 48T/96T
AmAC-1 鸡巨噬细胞替代激活相关化学因子1 规格: 48T/96T
bFGF 鸡碱性成纤维细胞生长因子 规格: 48T/96T
MYO/MB 鸡肌红蛋白 规格: 48T/96T
SIgA 鸡分泌型免疫球蛋白A 规格: 48T/96T
PPP 鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽 规格: 48T/96T
HSVⅡ-Ab 鸡单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体 规格: 48T/96T
PRL 鸡催乳素 规格: 48T/96T
FSH 鸡促卵泡素 规格: 48T/96T
LH 鸡促黄体激素 规格: 48T/96T
IC 鸡传染性鼻炎抗体 规格: 48T/96T
C3SP 鸡补体3裂解产物 规格: 48T/96T
DEV 鸡病毒性肠炎病毒 规格: 48T/96T
EGF 鸡表皮生长因子 规格: 48T/96T
ALV-AG 鸡白血病病毒抗原 规格: 48T/96T
PD 鸡白痢抗体检测 规格: 48T/96T
IL-4 鸡白介素4 规格: 48T/96T
IL-3 鸡白介素3 规格: 48T/96T
IL-2 鸡白介素2 规格: 48T/96T
IL-1β 鸡白介素1β 规格: 48T/96T
IL-18 鸡白介素18 规格: 48T/96T
IL-17 鸡白介素17 规格: 48T/96T
IL-1 鸡白介素1 规格: 48T/96T
IFN-γ 鸡γ干扰素 规格: 48T/96T
β-lactamase 鸡β内酰胺酶 规格: 48T/96T
IFN-β/IFNB 鸡β干扰素 规格: 48T/96T
α-glucosidase 鸡α葡萄糖苷酶 规格: 48T/96T
IFN-α 鸡α干扰素 规格: 48T/96T
NAG 鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 规格: 48T/96T
PAL 鸡L苯*解氨酶 规格: 48T/96T
CRP 鸡C反应蛋白 规格: 48T/96T
BF 鸡B因子 规格: 48T/96T
5-NT 鸡5核苷酸酶 规格: 48T/96T
17-KS 鸡17-酮类固醇 规格: 48T/96T
17-OHCS 鸡17羟皮质类固醇 规格: 48T/96T
1,3-βD glucosidase 鸡1,3-βD葡葡糖苷酶 规格: 48T/96T
Aflatoxin * 规格: 48T/96T
SJA 槐凝集素 规格: 48T/96T
PNA 花生凝集素 规格: 48T/96T
TRAIL-R3 猴子肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3 规格: 48T/96T
AChRab 猴子乙酰*受体抗体 规格: 48T/96T
PF-4/CXCL4 猴子血小板因子4 规格: 48T/96T
VEGFR-3 猴子血管内皮细胞生长因子受体-3 规格: 48T/96T
ADM 猴子肾上腺髓质素 规格: 48T/96T
GFAP 猴子神经胶质纤维酸性蛋白 规格: 48T/96T
HSP gp96 猴子热休克蛋白糖蛋白96 规格: 48T/96T
BNP 猴子脑钠素/脑钠尿肽 规格: 48T/96T
ET-1 猴子内皮素1 规格: 48T/96T
ET 猴子内毒素 规格: 48T/96T
MIF 猴子巨噬细胞移动抑制因子 规格: 48T/96T
MIP-1α/CCL3 猴子巨噬细胞炎性蛋白1α 规格: 48T/96T
Collagenase I 猴子胶原酶I 规格: 48T/96T
MMP11 猴子基质金属蛋白酶11 规格: 48T/96T
FSH 猴子促卵泡素 规格: 48T/96T
LTC4 猴子白三烯C4 规格: 48T/96T
IL-2R 猴子白介素2受体 规格: 48T/96T
IL-1 猴子白介素1 规格: 48T/96T
α1-MG 猴子α1微球蛋白 规格: 48T/96T
TNF-α 猴肿瘤坏死因子α 规格: 48T/96T
apo-B100 猴载脂蛋白B100 规格: 48T/96T
apo-A1 猴载脂蛋白A1 规格: 48T/96T
INS 猴胰岛素 规格: 48T/96T
sVCAM-1 猴可溶性血管细胞粘附分子1 规格: 48T/96T
sICAM-1 猴可溶性细胞间粘附分子1 规格: 48T/96T
LMA 猴抗肝细胞膜抗体 规格: 48T/96T
hs-CRP 猴超敏C反应蛋白 规格: 48T/96T
IFN-γ 猴γ 干扰素 规格: 48T/96T
IFN-α 猴α干扰素 规格: 48T/96T
E-Selectin/CD62E 猴E选择素 规格: 48T/96T
BV 猴B病毒 规格: 48T/96T
Lv/Vn 红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白 规格: 48T/96T
MHC/RhLA 恒河猴主要组织相容性复合体 规格: 48T/96T
SCT * 规格: 48T/96T
C4 鲑鱼补体蛋白4 规格: 48T/96T
C3 鲑鱼补体蛋白3 规格: 48T/96T
Vtg 蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原 规格: 48T/96T
TF 大鼠组织因子 规格: 48T/96T
t-PA 大鼠组织型纤溶酶原激活剂 规格: 48T/96T
TPA 大鼠组织多肽抗原 规格: 48T/96T
HD 大鼠组织蛋白去乙酰化酶 规格: 48T/96T
cath-K 大鼠组织蛋白酶K 规格: 48T/96T
histon-H2b 大鼠组蛋白H2b 规格: 48T/96T
HIS 大鼠组胺 规格: 48T/96T
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