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ELISA试剂盒技术资料

阅读:299发布时间:2015-9-30

一、DIY夹心法ELISA常见技术指南 
  elisa试剂盒  选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对;若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体;从同一家公司选择抗体对。ELISA实验中为了确定信号和zui低背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时,应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。标准品的配制:对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节。在使用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。
  elisa试剂盒  一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。为了优化灵敏度,建议放置一个晚上孵育标准品和标本。若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。当测定混合液体中的抗原时。

二、ELISA用处
  1. 将酶催化反应的放大作用和抗原抗体亲和反应的高度专一性、特异性相结合,以酶标记的抗原或抗体作为主要试剂进行免疫测试,所以具有很高的灵敏度。
  2. 实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位,或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。
 elisa试剂盒 3. 其抗原抗体反应具有高度的特异性。
  4. 为浓缩液,配有稀释液,稀释后直接可用,无需另行配置。
三、灰区的设置
    通常情况下,ELISA定性实验以“阳性"和“阴性"来报告结果,两者间有一条分界线被称为“阳性判断值"(cut-off value,CO值),这是定性免疫测定结果报告的依据。
四、标本复查
    ELISA手工检测过程复杂,影响因素较多,即使室内质控在控,也可能因孔间差异而造成结果的差异,因此加大复查力度是保证结果准确性的可靠方法,比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可疑、弱阳性标本及少见模式的检测结果进行复查。

DHRS4 短链脱氢酶/还原酶家族4抗体
DIRC2 干扰肾细胞癌蛋白2抗体
DGCR2 DGCR2蛋白抗体
DHRS7C 短链脱氢酶/还原酶家族7C抗体
ASMTY 松果体N甲基乙酰羟色胺抗体
DHPS1 短链脱氢还原酶1抗体
DNAJC7 DNAJC7蛋白抗体
DNMBP 动力结合蛋白DNMBP抗体
DPH2 白喉酰胺生物合成样蛋白2抗体
DLL3 Notch信号通路Delta样配体3抗体
DCTN2 动力蛋白激活蛋白2抗体
DOCK3 视神经细胞相关蛋白/早老素结合蛋白抗体
DHX32 DHX螺旋酶抗体
DISP2 转运蛋白DISP2抗体
DNA polymerase subunit II DNA聚合酶α2抗体
DHRS7B 短链脱氢酶/还原酶家族7B抗体
DPEP3 膜二肽酶3抗体
DUSP13 双特异性磷酸酶13抗体


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