elisa试剂盒原代分离细胞培养是指从供体内取出组织后，经机械以及消化分离成单个细胞或单一型细胞群，使之在体外模拟人体生理环境，在无菌、适当温度和一定的营养条件下，生存、生长和繁殖。原代培养细胞常有不同的细胞成分，生长缓慢，但是更能代表所来源的组织细胞类型和表达组织的特异性特征。利用原代细胞培养做各种实验，如药物测试、细胞分化及病毒学方面的试验效果很好。其操作步骤如下。
elisa试剂盒1. 剪切组织 先将所取得的组织，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用*去除黏附的结缔组织等非培养所需组织。再次清洗后，用*将组织切成若干小块，移入*小瓶或小烧杯中，加入适量缓冲液，用弯头眼科剪，反复剪切组织，直到组织成糊状，约1mm3大小。静置片刻后，用吸管吸去上层液体，加入适当的缓冲液再清洗一次。
2. 消化分离 消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞，以利于进一步的培养，常用的消化酶有*和胶原酶。
3. 培养 细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为(2～5)×105 cells／ml，或实验所需密度，分装于培养瓶中，使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内，5％CO2，37℃静置培养。一般3～5d，原代培养细胞可以黏附于瓶壁，并伸展开始生长，可补加原培养液量1／2的新培养液，继续培养2～3d后换液，一般7～14d可以长满瓶壁，进行传代。
4. 注意事项
(1)无菌操作：细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因，必须加强各个环节的无菌操作观念，以预防为主，一旦污染，一般很难消除。
(2)培养液：所用的培养液必须满足细胞生存和生长的必要条件。由于细胞来源的动物种类、组织类型elisa试剂盒不同，对培养液的要求有一定的差异，必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)小牛血清：小牛血清对于维持培养细胞的生存和促进细胞增殖起着关键性作用。可选择多种不同批号的小牛血清进行小样分析。一旦确定某一的某一批号小牛血清后，就保持应用至实验完成。
(4)*：必须新鲜配制，贮存时间过长(即使是-20℃低温保存)，也将影响消化效力，导致消化时间过长，细胞损伤增加。
(5)L-*：几乎所有细胞对*都有较高的要求，细胞需要*合成核酸和蛋白质，在缺少*时，细胞会因生长不良而死亡。*在溶液中很不稳定，加有*的培养液在4℃冰箱贮存两周以上时，就应重新加入原来量的*。
(6)静置培养：原代细胞在消化分离后，置于CO2培养箱的头24～48h (必要时72h)内，应处于静置状态，切忌不时地取出培养瓶观察生长状况，这将使原代分离细胞难以贴壁，更谈不上伸展和增殖，初学者尤应注意。不必担心培养液中的营养成分会消耗光，在细胞增殖之前对营养的要求并不大。原代培养初期仅加一薄层培养液的目的也在于有利于细胞贴壁伸展。
(7)消化时间：一般消化至肉眼尚可见微小组织颗粒即可，因为此时组织颗粒已经松散，略经吹打即成细胞团或单个细胞，过久的消化往往导致细胞损伤加重，细胞培养成活率降低。
elisa试剂盒(8)其他生长因子：经过以上处理，一般原代分离细胞培养均可以成功。对于少数特殊类型细胞也可以考虑加一些特殊的生长因子，如胰岛素能促使细胞摄取葡萄糖和氨基酸。另外，内毒素、EGF、FGF等均有促有丝分裂作用，但费用较高。
KIF13B 驱动蛋白家族蛋白13B抗体
KIF7 驱动蛋白家族蛋白7抗体
KAT3A CREB结合蛋白抗体
KNDC1 脑蛋白9抗体
Kindlin 2 丝裂原诱导蛋白2抗体
KLF17 锌指蛋白393抗体
KDM1 组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1抗体
KIF11 驱动蛋白样蛋白1抗体（甲状腺激素受体相互作用蛋白5）
KMT3B 组蛋白甲基化KMT3B抗体（雄激素受体激活蛋白）
Kv4.3 离子通道蛋白Kv4.3抗体
KLLN Killin-p53调节复制抑制蛋白抗体
Lysyl tRNA synthetase 赖氨酸tRNA的连接酶抗体
Kidins220 220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗体
