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技术文章

多克隆抗体的制备方法

阅读:420发布时间:2015-7-15

一、器材

ELISA试剂盒剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼科*子(游离血管用)一把、直头眼科*(剪血管用)一把,*架,*片,注射器(1ml、10ml,25ml)附针头,兔子固定架,灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头*四把,直头*两把,手术缝合线,塑料放血管,纱布等。

二、试剂

生理盐水

弗氏*佐剂(Freund’s complete adjuvant, FCA)

弗氏不*佐剂(Freund’s incomplete adjuvant, FIA)

二甲苯,酒精棉,脱脂棉,2% NaN3

三、ELISA试剂盒免疫原:蛋白或KLH偶联的多肽。每次免疫100-200μg免疫原。

四、兔子的选择

兔子的重量应在四斤以上,两耳光滑,明显可见耳静、动脉,健康。

五、免疫

ELISA试剂盒用生理盐水稀释免疫原,然后与相应的佐剂进行1:1混合。抗原和佐剂*混合形成稳定的乳剂,将该乳剂在兔子双肩周围的皮肤下进行皮下注射和后大腿进行肌肉注射。每个区域大约用1/4的免疫原。这样免疫原可以持久存在从而提高免疫应答。


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