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ELISA法细胞凋亡

阅读:267发布时间:2015-7-13

ELISA试剂盒法细胞凋亡检测操作步骤:

1.收集细胞,离心后,用200μl溶细胞缓冲液重新悬浮,室温下作用30min。(培养细胞的上清液、血浆和血清都可作为检测样本)

2.取样品离心后(1 000r/min,10min),吸取20μl上清液,加入链霉亲合素包被的培养板孔中。

3.加入80μl免疫反应试剂含抗-DNA-POD、抗组蛋白-*及温育缓冲液(按1︰1︰18混合),室温下孵育2h(置摇床上,250r/min)。

4.ELISA试剂盒取上清,用300μl温育缓冲液洗涤3次,小心移去洗涤液。

5.加入100μl底物缓冲液,室温下孵育使颜色变化至适合(置摇床上)。

6.ELISA试剂盒尽快作比色分析(10min~20min内),用底物缓冲液作空白对照,以波长405nm,参考波长492nm进行检测。


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