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华腾专家教您如何选择液相色谱固定相
点击次数：1129 发布时间：2015-10-22
反相液相色谱可供选择的固定相品种繁多令人头昏眼花，即便是某一种固定相(例如C18)的可选择品种也是很多的。
诚实说，我们的很多办法开发都是在尝试和错误中停止，这些都是基于我们喜欢的供给商提供的成熟的或者新兴的固定相。即便是*的含有认真考量的正交化及电脑优先洗脱设计的“挑选”平台，有时也不得不采取“色谱的本能”。
反相色谱中的保存是基于被剖析物、活动相、键合相以及键合了配体的硅胶外表的活性和其可接触性之间的均衡。想要搞分明影响别离效果的保存机理，就要思索并明白化学键合相、活性硅胶外表的处置、硅胶外表的可接触性等要素，这些都将影响色谱柱的原始选择性及办法开发的优化。
在大多数反相别离中色散作用是起主要作用的，特别是那些运用未改性的烷基配体(C18、C8、C4)，其保存才能是与被剖析物的疏水性成正比的。含有芳香基团或不饱和基团的固定相或被剖析物停止剖析时，电荷转移(或π-π)作用是起主要作用的。偶极-氢键互相作用关于极性化合物的保存是很重要的，含有“氰基”的固定相会加强对极性化合物的保存。被剖析物的电离局部与硅胶外表之间存在静电作用力，这是由于硅胶外表有残留的可离子化的硅醇基。
当前有许多色谱柱分类系统存在，这些系统都是基于对已知化学探针物质的检测，从而来描绘固定相的共同特性。一个十分有用的例子就是美国药典(USP)中的产质量量研讨数据库(也就是PQRI系统)。该数据库采用保存(1,2)的疏水减法模型来描绘固定相的疏水性(H)，判别疏水性相似而有不同外形或流膂力学体积的被剖析物的空间构造选择性参数(S),在pH值为7.0和2.8时的氢键(作为路易斯酸或路易斯碱)和静电作用参数(C)。pH值为7.0时硅醇基活性很强，pH为2.8时具有酸性的硅醇基将会与极性或可离子化的被剖析物发作作用产生拖尾。共同的或正交的固定相普通会有较大的S、B和C(7.0)值。这些大型的数据库关于比拟固定相的特性是很有用的，“雷达图”也是另一种比拟固定相特性的有用方式。
诚实说，我们的很多办法开发都是在尝试和错误中停止，这些都是基于我们喜欢的供给商提供的成熟的或者新兴的固定相。即便是*的含有认真考量的正交化及电脑优先洗脱设计的“挑选”平台，有时也不得不采取“色谱的本能”。
反相色谱中的保存是基于被剖析物、活动相、键合相以及键合了配体的硅胶外表的活性和其可接触性之间的均衡。想要搞分明影响别离效果的保存机理，就要思索并明白化学键合相、活性硅胶外表的处置、硅胶外表的可接触性等要素，这些都将影响色谱柱的原始选择性及办法开发的优化。
在大多数反相别离中色散作用是起主要作用的，特别是那些运用未改性的烷基配体(C18、C8、C4)，其保存才能是与被剖析物的疏水性成正比的。含有芳香基团或不饱和基团的固定相或被剖析物停止剖析时，电荷转移(或π-π)作用是起主要作用的。偶极-氢键互相作用关于极性化合物的保存是很重要的，含有“氰基”的固定相会加强对极性化合物的保存。被剖析物的电离局部与硅胶外表之间存在静电作用力，这是由于硅胶外表有残留的可离子化的硅醇基。
当前有许多色谱柱分类系统存在，这些系统都是基于对已知化学探针物质的检测，从而来描绘固定相的共同特性。一个十分有用的例子就是美国药典(USP)中的产质量量研讨数据库(也就是PQRI系统)。该数据库采用保存(1,2)的疏水减法模型来描绘固定相的疏水性(H)，判别疏水性相似而有不同外形或流膂力学体积的被剖析物的空间构造选择性参数(S),在pH值为7.0和2.8时的氢键(作为路易斯酸或路易斯碱)和静电作用参数(C)。pH值为7.0时硅醇基活性很强，pH为2.8时具有酸性的硅醇基将会与极性或可离子化的被剖析物发作作用产生拖尾。共同的或正交的固定相普通会有较大的S、B和C(7.0)值。这些大型的数据库关于比拟固定相的特性是很有用的，“雷达图”也是另一种比拟固定相特性的有用方式。