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上海丰寿实业有限公司


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公司动态

慢病毒包装试剂盒

阅读:809发布时间:2015-6-10

提供所有的转录并包装RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。
本公司转染试剂Lentifect是针对真核细胞转染的转染试剂,该转染试剂对细胞毒性较小,可在含血清与抗生素的*培养液中充分发挥作用,对常用于蛋白表达的多种细胞都有较高的转染效率,可广泛用于瞬时和稳定转染,也可以用于蛋白表达和基因功能的研究。与其他转染试剂相比,本公司转染试剂不仅具有高转染效率,而且价格便宜,是性价比*的真核转染试剂。
本公司提供293T包装细胞系,选择处于生长旺盛期,细胞状态较佳,存活率90%以上,细胞边缘清晰,传代次数较低。与优化的其他组份共同包装产生高滴度慢病毒颗粒。
慢病毒包装                                                                                     
以六孔板中的1孔为例,每个样品需要1×106个293T细胞。
1. 转染前24 h,用*消化对数生*的细胞,以含10%FBS的培养基调整细胞密度为5.0×105/ml,接种6孔板,每孔2 ml,37°C,5% CO2培养箱培养;24 h待细胞密度达到80~90%时即可用于转染;
2. 取1.5 ml灭菌EP管,取2 μl慢病毒表达载体和10 μl慢病毒辅助载体溶于200 μl的无血清培养基;轻柔混匀,室温孵育5 min;
3. 取1.5 ml灭菌EP管,取20 μl Lentifect溶于200 μl无血清培养基中;轻柔混匀,室温孵育5 min;
4. 将DNA溶液和转染试剂溶液轻柔混匀;室温孵育15 min,即为转染复合物;
5. 取出接种好细胞的培养板,将转染复合物加入,轻轻晃动混匀,37°C,5% CO2培养箱培养;
6. 4~6 h后,移除含有转染复合物的培养基,代之以DMEM*培养基(含10%FBS);
7. 继续培养48 h收获含病毒的上清;3000 rpm 离心10 min,去除沉淀;
8. 病毒上清4°C贮存。


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