本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 5 羟色胺(5-HT)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入， 再与 HRP 标记的 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤 后加底物TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的 黄色。颜色的深浅和样品中的 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸 光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中浓度。
大鼠 5 羟色胺(5-HT)标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。
即为样品的实际浓度。
大鼠 5 羟色胺(5-HT)注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未 用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间 控制在 5 分钟内，如标本数量多，*使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值 大于标准品孔*孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计 算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月
