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PANBIO登革热IgG ELISA检测试剂盒
PANBIO登革热IgG ELISA检测试剂盒(Dengue IgG Indirect ELISA)可以通过间接法来检测出登革热病原的4个血清型的血清中的IgG抗体,然后通过辅助临床实验室来诊断出现疑似登革热临床表现的或者是以前感染过登革热病毒的二次甚至多次感染患者。
广州健仑生物科技有限公司是Panbio品牌在中国的总代理商,除了黄热病毒检测试剂外,还有虫媒病毒、衣原体、疱疹病毒、Reagent、呼吸道病毒和人兽共患病(例:立克次体、钩端螺旋体等)的检测试剂,咨询。
媒:今天我们终于请到了中山市科研中心的周老师来接受采访,我们知道周老师已经研究了数年的登革热,请问周老师您对登革热IgG抗体间接法ELISA检测试剂盒是怎么看的?
周:对于登革热IgG抗体间接法ELISA检测试剂盒的话我比较喜欢用Panbio这个牌子的。一般来说,*感染登革热病毒的人体内的登革热IgG抗体需要在感染后的10天左右才开始产生,17天左右才可做以IgG抗体检测病毒中和实验,人体的登革热病毒IgG抗体可以持续高浓滴度很久。Panbio登革热IgG抗体间接法ELISA检测试剂盒可以通过间接法来检测出登革热病原的4个血清型(1、2、3、4)的血清中的IgG抗体,然后通过辅助临床实验室来诊断出现疑似登革热临床表现的或者是以前感染过登革热病毒的二次甚至多次感染患者。
媒:这种登革热检测试剂的检测原理是什么呢?
周:就是微孔测试条上的登革热抗原结合物与血清中的登革热IgG抗体相结合后,清洗掉多余的血清并加入被过氧化物酶标记的抗人IgG抗体;然后清洗微孔,添加TMB显色液(四甲基联苯胺/过氧化氢);当底物被酶水解了之后显色液变蓝且当用酸来终止反应后显色液变黄的话,就表示在测试的血清样本中存在登革热IgG抗体。
媒:哦~是这样啊,那在检测的过程中应该有许多事情需要注意的吧。
周:那是当然了,我简单说一下。1,这个测试只能用血清而不能用全血或者血浆等来执行;2,黄疸、脂血症血清或有溶血、微生物生长的血清不能被使用来做该检测;
3,转移试剂的话可能会导致污染,所以要用干净的吸液头从试剂瓶中吸出试剂;
4,还没有使用的微孔要重新密封起来并储存于干燥的环境中,要不然的话以后可能会产生错误的结果。
媒:我们知道这个既然是ELISA检测试剂,那肯定在检测的过程中会经过ELISA程序的,请问周老师关于这个Panbio登革热IgG抗体间接法ELISA检测试剂盒的ELISA程序是怎么样的?
周:首先呢,在进行ELISA程序之前要把检测所要用到的试剂平衡到20-25度。我简单说一下吧,1. 从铝箔袋中取出所需数量的微孔板并插入测试条槽。阴性质控品、阳性质控品和校准品各需 5 个微孔,一式三份。确保剩下未使用的微孔密封于铝箔袋内。
2. 使用适当的试管或微滴定板稀释阳性质控品(P)、阴性质控品(N)、校准品(CAL)和患者样本。
(a) 混合 10μL 血清与 1000μL 样本稀释剂。混合均匀。
或者,
(b) 混合 10μL 血清与 90μL 样本稀释剂。取出 20μL 稀释血清,加入 180μL 样本稀释剂。
混合均匀。
3. 吸取 100 μL 样本稀释剂、质控品和校准品添加至对应的微孔中。
4. 盖住测定板并在 37°C ± 1°C 孵育 30 分钟。
5. 用稀释后的清洗缓冲液洗 6 次。
6. 吸取 100 μL HRP 标记抗人 IgG 添加到每个微孔中。
7. 盖住测定板并在 37°C ± 1°C 孵育 30 分钟。
8. 用稀释后的清洗缓冲液洗 6 次。
9. 吸取 100 μL TMB 添加到每个孔中。
10. 在室温(20-25℃)下孵育 10 分钟,从*次添加开始计时。蓝色将会显现。
11. 按照相同顺序吸取 100μL 终止液添加到每个孔中,计时同 TMB 添加步骤。混合均匀。蓝色将变成黄色。
12. 在 30 分钟内读取每个孔在 450nm 波长的吸光度,参考滤波器为 600-650nm。
媒:周老师说的简单,不过我听起来感觉是不太简单啊,相信动手做起来的话就更不简单了,感谢周老师在百忙之中抽空来接受我们的采访,希望以后还能有机会采访您。
本公司还代理--日本生研、日本富士、丹麦SSI、SD、Novabios、Carestart、Cortez、美国FOCUS和美国BinaxNow等品牌的各种产品,例如:虫媒传染病、诊断血清、甲乙流感、质控品和生物原料等,。
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