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美国NovaBios黄热病病毒诊断试剂（美国CDC使用）

广州健仑生物科技有限公司

本公司专业供应各种进口品牌黄热病检测试剂盒，包括美国的NovaBios、广州创仑等CDC品牌。主要包括胶体金、酶免、PCR等方法学。欢迎咨询

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美国CDC的黄热病毒诊断试剂——美国的NovaBios

美国NovaBios黄热病病毒诊断试剂（美国CDC使用）

【黄热病简介】
黄热病，历*称为黄色杰克，黄色瘟疫或青铜约翰，是一种急性病毒性疾病。在大多数情况下，症状包括发热，寒战，食欲不振，特别是在背部的肌肉痛，和头痛。症状通常在五天内改善。在一些人在一天内改善，发烧回来，腹痛发生，肝损伤开始导致黄色皮肤。如果发生这种情况，出血和肾脏问题的风险也增加。

【检测原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特异性抗原。将对照或测试样品加入到合适的孔中并孵育。用洗涤缓冲液洗去游离组分。将HRP缀合的检测试剂加入到孔中。TMB底物用于显现HRP酶反应。TMB由HRP催化以产生在加入酸性停止溶液后变为黄色的蓝色产物。黄色的密度与板中捕获的样品的YFV-IgM/IgG量成比例。外径在微板读数器中在450nm下通过分光亮度计测量吸亮度，然后可以计算YFV-IgM/IgG的浓度。

产品规格：96T/盒
检测范围：定性
灵敏度：定性
储存和使用期：2-8℃ 储存12个月
产品应用：用于定性检测人血清，血浆，细胞培养上清液或任何生物液体中的YFV-IgM。

【套件组件】
1.一个96孔板预涂
2.阳性对照：0.5ml
3.阴性对照：0.5ml
4.洗涤缓冲液（30×）：20 ml。稀释：1:30
5.样品稀释缓冲液：6ml
6.6HRP酶联试剂（RTU）：6ml
7.终止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培养箱
2.酶标仪（波长：450nm）
3.精确的移液器和一次性移液器吸头
4.自动洗板机
5.ELISA振荡器
1.5ml管
7.板盖
8.吸收滤纸
9.100ml和1L体积量筒。

【操作程序】
A.制备样品和试剂
1. 样品
收集并立即分析测试样品（2小时内）后立即分离。或等分并长期储存在-20°C。避免多个冻融循环。
细胞培养上清：以约2000-3000×rpm离心20分钟，以去除沉淀，立即分析或分装，并储存于-20℃。
血清：在室温下凝结血清（约4小时）。以约2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析血清或等分，并储存在-20°C。
血浆：用柠檬酸盐或EDTA作为抗凝剂收集血浆。在收集30分钟内以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
尿：在无菌容器中收集，以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
组织：组织匀浆的制备将根据组织类型而变化。收集和冲洗样品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。称重样品并用PBS（Ph 7.4）匀化，并对细胞悬浮液进行超声处理。以2000-3000×rpm离心20分钟。立即测定或等分并储存在-80℃。
（注意：1.*凝结血液样品，离心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作试验样品防腐剂，因为它抑制HRP。）

2.洗涤缓冲液
用蒸馏水稀释浓缩洗涤缓冲液30倍（1/30）（即将20ml浓缩洗涤缓冲液加入580ml蒸馏水中）。

B.测定程序
在使用前将试剂盒组分和样品平衡至室温。建议绘制每个测试的标准曲线。
1.在预涂板上分别设置阳性/阴性，测试样品和对照（零）孔，并记录它们的位置。
2.将50μl的阴性和阳性对照等分到设定的孔中。
3.向对照（零）孔中加入50μl样品稀释缓冲液。
4.向测试样品孔中加入50μl适当稀释的样品（样品稀释比例：1：5）。在底部加入溶液而不接触侧壁。摇动平板以混合内容物。
5.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
6.取下盖子并通过在吸收性滤纸或其他吸收材料上敲击板来丢弃板内容物。
7.弃去溶液，用洗涤缓冲液洗涤板5次。不要让孔在任何时候*干燥。
手动清洗：丢弃溶液，不要接触侧壁。将吸水滤纸或其他吸收材料上拍出液体。将洗涤缓冲液填满每个孔，并在ELISA振荡器上轻轻涡流2 分钟。丢弃内容物，并将吸收性滤纸或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自动洗涤：弃去所有孔中的溶液，并用洗涤缓冲液洗涤板5次（用缓冲液过量填满孔）。在zui后的洗涤之后，翻转该板并敲击吸收性滤纸或其它吸收材料。建议将清洗器设置为1分钟的浸泡时间。
8.向每个孔中加入50μlHRP结合物的试剂（对照孔除外）。在每个孔底部加入溶液，不要接触侧壁。
9.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
10.取下盖子，用洗涤缓冲液洗板5次。
11.向每个孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，盖上平板并在37℃下孵育15分钟。避免暴露于光。
12.向每个孔中加入50μl终止液，充分混匀。颜色应立即变为黄色。
13.阅读O.D.在微板读数器中在450nm的吸亮度在加入终止溶液的15分钟内。对于计算，（相对O.D.450）=（每个孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。标准曲线可以作为每种标准溶液（Y）的相对O.D.450与标准溶液（X）的相应浓度作图。可以从标准曲线插入样品的人类YFV-IgM浓度。
14.注意：如果稀释样品，稀释倍数乘以内插法得到稀释前的浓度。

C.结果确定
1.试验有效性：阳性对照的平均值≥1.00; 阴性对照的平均值≤0.10。
2.临界值（CUT OFF）计算：临界值=负控制的平均值+0.15
3.阴性结果：如果OD值<CUT OFF，样品为人YFV-IgM阴性。
4.阳性结果：如果OD值≥CUTOFF，样品为人类YFV-IgM阳性。

D.注意事项
1.在实验之前，离心每个试剂盒组分数分钟，将所有试剂倒入试管底部。
2.在混合或重新组装部件时避免起泡或气泡。
3.洗涤缓冲液可结晶并分离。如果发生这种情况，请加热管以溶解。
4.建议每个对照和样品一式两份或重复测量三次。
5.不要让板在任何时候*干燥！这可以使板上的生物材料失活。
6.不要重复使用移液器吸头和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中过期的组件或组件。
8.将TMB底物B储存在黑暗中，并且为了避免板温育对于温度差的边缘效应，建议在使用前在室温下使TMB底物平衡30分钟。用灭菌的吸头抽吸所需的剂量，不要将残留溶液倒回到小瓶中。

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如果您有以下任何一种情况，您的医务人员可以帮助您决定是否可以安全接受疫苗：
艾滋病毒/艾滋病或其他影响免疫系统的疾病
由于癌症或其他医疗条件，移植或药物治疗（如类固醇，化学疗法或其他影响免疫功能的药物）而导致的免疫系统减弱，
胸腺疾病
成年人60岁以上
婴儿6 - 8月龄
孕妇和哺乳的母亲
有关禁忌症和预防措施的其他信息，请参阅黄热病疫苗。
黄热病疫苗接种多久？
对于大多数人来说，一剂疫苗提供了持久的保护。某些人可能受益于另一剂疫苗，因为他们的免疫系统有问题或者处于更高风险的环境中。有关黄热病疫苗的更多信息，请参阅疫苗页面。
我要去专门诊所接受黄热疫苗吗？
是。黄热病疫苗受“卫生条例”管制，所以只有授权的供应商才能管理疫苗。黄热病疫苗的大多数提供者也可以为您提供其他疫苗或药物用于旅行。要查找授权的黄热病疫苗接种诊所，请参阅我们的黄热病疫苗接种诊所提供者列表。
黄热病疫苗是否推荐给60岁以上的人，将会到有黄热病的地区？
与年轻人相比，年龄≥60岁的人群在接种疫苗后可能面临严重不良事件（严重疾病或极少死亡）的风险增加。如果他们接受了*次黄热病疫苗接种，情况尤其如此。年龄≥60岁的旅行者应根据旅行计划与其医疗保健提供者讨论疫苗的风险和收益。除了考虑疫苗外，旅游者要保护自己免受黄热病和其他媒介传播疾病的侵害。预防措施包括穿长袖和长裤的衣服，并使用有效的驱虫剂，如含有DEET，吡啶，IR3535或柠檬桉树油的驱虫剂。
黄热病疫苗的副作用是什么？
对黄热病疫苗的反应一般温和。它们可以包括轻度头痛，肌肉酸痛和低级发烧。据报道，黄热病疫苗接种后极少罕见但严重的事件。见黄热病疫苗的反应。
我想我从疫苗生病了，该怎么办？
咨询您的医护人员。如果他或她认为疫苗已经使您生病，请向医疗保健提供者报告您的病例到疫苗不良事件报告系统（VAERS）。
黄热病疫苗是否含有硫柳汞？
不，FDA批准的黄热病疫苗不含硫柳汞。
在接受黄热病疫苗接种后，女性应等待多久？

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我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

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COMMON ADVERSE REACTIONS
Reactions to yellow fever vaccine are generally mild; 10%–30% of vaccinees report mild systemic adverse events. Reported events typically include low-grade fever, headache, and myalgia that begin within days after vaccination and last 5–10 days. Approximay 1% of vaccinees temporarily curtail their regular activities because of these reactions.
SEVERE ADVERSE REACTIONS
Hypersensitivity—Immediate hypersensitivity reactions, characterized by rash, urticaria, or bronchospasm are uncommon. Anaphylaxis after yellow fever vaccine is reported to occur at a rate of 1.3 cases per 100,000 doses administered.
Yellow Fever Vaccine–Associated Neurologic Disease (YEL-AND)—YEL-AND represents a conglomerate of clinical syndromes, including meningoencephalitis, Guillain-Barré syndrome, acute disseminated encephalomyelitis, and rarely, cranial nerve palsies. Historically, YEL-AND was seen primarily among infants as encephalitis, but more recent reports have been among people of all ages. YEL-AND is rarely fatal.
Among all cases of YEL-AND reported globally, almost all occurred in first-time vaccine recipients. The onset of illness for documented cases in the United States is 2–56 days after vaccination. The incidence of YEL-AND in the United States is 0.8 per 100,000 doses administered. The rate is higher in people aged ≥60 years, with a rate of 2.2 per 100,000 doses.
Yellow Fever Vaccine–Associated Viscerotropic Disease (YEL-AVD)—YEL-AVD is a severe illness similar to wild-type disease, with vaccine virus proliferating in multiple organs and often leading to multiple organ dysfunction syndrome or multiorgan failure and death. Since