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人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒原理

阅读:344发布时间:2014-3-28

人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒    Human Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit     ,规格:96T/48T,产品别名:    人转化生长因子β1(TGF-β1)检测试剂盒
人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒原理的简要说明书:TGFβ1 是一种氨基酸数目为112个,分子量25KDa的二聚体蛋白质。在各种属间高度保守,例如人和大鼠、小鼠有*相同的氨基酸序列。几乎所有细胞都有TGFβ1的受体,其对细胞的生长、分化的影响是非常广泛的。总之,间质来源细胞受TGFβ1的刺激,而肝细胞、T、B淋巴细胞、角化上皮和很多内皮细胞受TGFβ1的抑制作用。
人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒操作步骤
使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。 
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