一抗和二抗的定义、作用与选择

‌一抗和二抗的种属来源通常是一样的‌。在选择二抗时，通常需要根据一抗的种属来源来选择相应的二抗。例如，如果一抗是小鼠源的单克隆抗体，那么二抗应选择抗小鼠的二抗（如山羊抗小鼠或兔抗小鼠）。‌

一抗和二抗的定义和作用

‌一抗（primary antibody）‌：是一种免疫球蛋白，能够特异性结合特定的蛋白，并将其纯化、检测和定量。一抗可以是多克隆抗体（pAb）或单克隆抗体（mAb），分别由多个B细胞克隆产生或由单一B淋巴细胞分泌产生。

‌二抗（secondary antibody）‌：直接与靶抗原连接的一抗结合，通常用于标记和检测一抗。二抗可以是完整抗体或抗体片段，如IgG分子、Fab片段以及F(ab’)2片段。

选择二抗时需要考虑的因素

‌一抗的种属来源‌：二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源。例如，如果一抗是小鼠源的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗（如山羊抗小鼠或兔抗小鼠）。

‌一抗的类别和亚类‌：二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体；单克隆抗体由于存在不同的亚型，选择二抗时需要根据一抗的类型或亚类相匹配。

‌实验类型‌：不同的实验类型可能需要不同类型的二抗。例如，在双标实验中，如果两个一抗分别来自不同的种属，则二抗应选择来自第三种种属的抗体，以避免交叉反应。