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胰蛋/白酶在细胞培养中的作用一览

时间:2022-7-27阅读:500
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 胰蛋/白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰/酶的作用反应不一样。胰/酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在 pH 为 8.0 、温度为 37℃ 时,胰/酶溶液的作用能力最/强。使用胰/酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰/酶的活性,所以配制胰/酶溶液时应选用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ,如: D-Hanks 液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰/酶抑制剂终止胰/酶对细胞的作用。

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1. 称取胰蛋/白酶:按胰蛋/白酶液浓度为 0.25 %,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调 PH 到 7.2 左右)或 PBS ( D-hanks )液中。搅拌混匀,置于 4℃ 内过夜。

2. 用注射滤器抽滤消毒:配好的胰/酶溶液要在超净台内用注射滤器( 0.22 微米微孔滤膜)抽滤除菌。

3. 分装成小瓶于 -20℃ 保存以备使用可!

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