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上海远慕技术详解:免疫血qin纯化抗体操作
免疫血清(immuneserum)亦称抗血清。含有抗体的血清制剂。种类很多,包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。关于免疫血qin纯化抗体的详细操作步骤我公司专业技术提供专业的技术指导。如下:
1.剪取一小条0.45μm的硝酸纤维膜,置于1.5mleppendorf管中,浸没于1ml1mg/ml的抗原溶液中,5min。
2.取出膜,置于滤纸上干燥。
3.将膜放置于装有1mlBufferA的eppendorf管,轻轻震荡混匀30min。
4.移去BufferA,用新鲜的BufferA洗一次,将膜浸没于0.8-1ml相应的抗血清中,1-2h,于混匀器上轻轻震荡混匀。
5.移去血清,用PBS洗膜,4次,每次5min。
6.洗脱抗体
新配置100mM甘氨酸(pH2.5)抗体洗脱液,将膜置于洗液中,手轻摇混匀2min,迅速将洗液转移至装有100μl1MTris(pH8.0)中和,使抗体复性。第1次洗脱用400μl抗体洗脱液,第2,3次用200μl。
7.往洗脱下来的液体中加入100μlBufferA以稳定抗体,并分装成30μl每管,于-20℃保存。
注:所有步骤均在室温完成。
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