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Elisa试剂盒包被中所需条件?
今日,上海大学王琦同学向我司技术咨询了elisa试剂盒在包被中所需要的条件?这种问题可能许多老师在实验检测中也有所疑问,对此,我司技术特别书面整理说包被及包被所需要的条件有哪些?方便今后客户在遇到这类问题能够及时的修正处理问题。
Elisa试剂盒在检测中有一个词叫包被,我们生物界将抗原或抗体固定在过程称为包被(coating)。换言之,包被即是抗原或抗体结合到固相载体表面的过程。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用力。
那么Elisa试剂盒包被中所需要的条件是什么呢?
包被用抗原或抗体的浓度,包被的温度和时间,包被液的pH等应根据试验的特点和材料的性质而选定。抗体和蛋白质抗原一般采用pH9.6的碳酸盐缓冲液作为稀释液,也有用pH7.2的磷酸盐缓冲液及pH7~8的Tris-HCL缓冲液作为稀释液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置过一夜,37℃中保温2小时被认为具有同等的包被效果。包被的zui适当浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化,每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协调选定。一般蛋白质的包被浓度为100ng/ml-20ug/ml。
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