微生物ATP酶（ATPase）酶联免疫分析试剂盒说明书

本试剂盒用于测定微生物样本中ATP酶（ATPase）含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人ATP酶（ATPase）水平。用纯化的人ATP酶（ATPase）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入ATP酶（ATPase），再与HRP标记的ATP酶（ATPase）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的ATP酶（ATPase）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人ATP酶（ATPase）浓度。

微生物ATP酶（ATPase）酶联免疫分析试剂盒组成

130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶

2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（2000nmol/L）0.5ml×1瓶

3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶

4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份

5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张

6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。微生物ATP酶（ATPase）酶联免疫分析试剂盒操作步骤

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

1000nmol/L5号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液

500nmol/L4号标准品150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液

250nmol/L3号标准品150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液

125nmol/L2号标准品150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液

62.5nmol/L1号标准品150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液