病毒RNA提取试剂盒说明书
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名称:病毒RNA提取试剂盒
品牌:Omega
供应商:上海远慕
货号/型号:R6874-00/E.Z.N.A.®Viral RNA Kit(5)
货号/型号:R6874-01/E.Z.N.A.®Viral RNA Kit(50)
货号/型号:R6874-02/E.Z.N.A.®Viral RNA Kit(200)
用途:从血液、尿液、分泌液和其它无细胞体液中纯化RNA
病毒RNA提取试剂盒特点:
快速纯化得到高质量病毒DNA和RNA。
无有机抽提或yichun沉淀。
重复性强,产量高。
*去除污染物和抑制剂,方便下游应用。
下游应用:
病毒RNA检测
病毒流行病学研究
传染病研究
病毒RNA提取试剂盒操作步骤:
提示:*次使用前请先在15ml漂洗液RW中加入55ml无水yichun,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入yichun,以免多次加入!
1.200μl血清等体液(需回复到室温,不足可用0.9% NaCl或者PBS补足)转入上述1.5ml离心管,加入400μl 裂解液RLB, 立刻涡旋振荡充分混匀。
2.室温(15-25℃)放置10分钟,每隔5分钟,振荡混匀一次。
3.加入450μl无水yichun,立刻涡旋振荡充分混匀。如果周围环境高于25℃,yichun需要冰上预冷后再加入。
4.将上述混合物加入一个吸附柱RA中,(吸附柱放入收集管中)13,000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液。如果总体积超过750μl,可分两次将溶液加入同一个吸附柱RA中。
5.加500μl去蛋白液RE,12,000rpm离心30秒,弃废液。
6.加入500μl漂洗液RW(请先检查是否已加入无水yichun!),12,000rpm 离心30秒,弃废液,加入500μl漂洗液RW,重复一遍。
7.将吸附柱RA放回空收集管中,13,000rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留yichun抑制下游反应。
8.取出吸附柱RA,放入一个RNase free的离心管中,在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free H20(事先在 65-70℃水浴中加热效果更好), 室温放置1分钟,12,000rpm 离心1分钟。如果想得到较多量的RNA,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,12,000rpm离心1分钟。洗脱体积越大,洗脱效率越高。如果需要RNA浓度较高,可以适当减少洗脱体积, 但是zui小体积不应少于20μl,体积过小降低洗脱效率,减少RNA产量。
9.RNA病毒建议立刻使用,否则立刻短期放置在-70℃备用。
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